Arbeitsablauf: ELISA Assay-Protokoll
 
Antikörper bindet an Vertiefung

FÄNGER-ANTIKÖRPER BINDET AN VERTIEFUNGEN

Als erstes, wird der Fänger-Antikörper an den Boden der Mikroplatten-Vertiefung gebunden.

Mikroplatten-Vertiefungen

ELISA-Platte

Die meisten ELISAs werden in 96- oder 384-Well-Mikroplatten durchgeführt, wobei die 96-Well-Mikroplatte am üblichsten ist und manchmal als „ELISA-Platte“ bezeichnet wird. Der Boden der Mikroplatten-Vertiefungen (Wells) dienen als eine solide Oberfläche, an die sich Antikörper und andere Reagenzien anheften. Üblicherweise sind die Mikroplatten Bestandteil eines ELISA-Kits.

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PROBE HINZUGEBEN

Die Probe wird zum Well hinzugegeben und das Antigen in der Probe bindet an den Fänger-Antikörper.

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WASCHEN DER MIKROPLATTE

Ungebundenes Material wird weggewaschen, so dass nur das zu untersuchende Antigen übrig bleibt, und die Gefahr hoher Hintergrundsignale minimiert wird.

ELISA-Plattenreader und -Washer

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Die Nutzung des EMax Plus Microplate Readers mit der SoftMax Pro Data and Acquisition Software und dem MultiWash+ Microplate Washer bietet eine Komplettlösung für Ihren ELISA-Arbeitsablauf.

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HINZUFÜGEN DES NACHWEIS-ANTIKÖRPERS

Der Enzym-konjugierte Nachweis-Antikörper bindet an eine zweite Stelle auf dem zu untersuchenden Antigen und ermöglicht so den Nachweis des Antigens.

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WASCHEN DER MIKROPLATTE

Ungebundene Antikörper werden weggewaschen, so dass nur die zurückbleiben, die für das Antigen spezifisch sind, und auch so wieder die Gefahr für Hintergrundsignale minimiert wird.

AquaMax Mikroplatten-Washer

ELISA Plate Washer

Der AquaMax Microplate Washer: Die Aspiration und Dispension erfolgt auf 96- und 384-Well-Platten in allen Wells gleichzeitig. Dies ermöglicht hoch präzise Assays und schnelleres Bearbeiten der Mikroplatten ohne mechanische Platten-Indexierung oder Quadranten-Abarbeitung.

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ZUGABE DES SUBSTRATS

Das Substrat wird durch das Enzym am Nachweis-Antikörper umgewandelt. Dabei erzeugt es eine Farbveränderung, deren Intensität proportional zur Menge des anwesenden Antigens ist.

Je nach verwendetem Enzym und Substrat kann der Nachweis fluoreszent oder lumineszent erfolgen.

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PLATTE MESSEN

Der Mikroplatten-Reader detektiert das farbige Reaktionsprodukt und gibt die Werte für die optische Dichte (OD) aus. Diese geben an, wie viel Licht durch die Inhalte jeder Vertiefung absorbiert wurde.

Prinzip des ELISA-Plattenreaders

ELISA-Plattenreader

Ein ELISA-Plattenreader wie der SpectraMax ABS Plus Absorbance ELISA Microplate Reader, detektiert die Farbveränderung, die in Anwesenheit des Zielantigens erzeugt wird. Er tut dies, indem er misst, wie viel des Lichts, das durch die Vertiefungen der Mikroplatte geleitet wird, durch das Material innerhalb der Vertiefung absorbiert wird. Je mehr Antigen vorliegt, desto höher ist der Absorptionswert.

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ELISA Plattenreader-Software

ELISA Plattenreader-Software

Eine ELISA Plattenreader-Software wie unsere SoftMax Pro Datenanalyse-Software, wird angewendet, um Standardkurven graphisch darzustellen und aus den vom Mikroplatten-Reader gelieferten Absorptionswerten Ergebnisse zu berechnen.

Eine Standardkurve wird durchgeführt, damit die Menge an Antigen in jeder Probe genau berechnet werden kann. Ein vorkonfiguriertes Protokoll verhilft zu Zeitersparnissen, indem es die Ergebnisse automatisch berechnet.

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ERGEBNISSE BERECHNEN

Die Menge an Antigen in jeder Probe wird berechnet und verschiedene Proben – zum Beispiel Zellen, die unterschiedlichen Behandlungsbedingungen unterworfen wurden – können verglichen werden.

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Automatisieren Sie Ihren Arbeitsablauf

Wir bieten skalierbare, automatisierungsfertige Arbeitszellen, die von Einsteigermodellen bis hin zu Profi-Arbeitszellen reichen, und die an Ihre spezifischen Forschungsanforderungen angepasst werden können.

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Automatisierungsfertige ELISA-Arbeitszellen

Die Automatisierung eines ELISA-Arbeitsablaufs kann die mühsamen Schritte der Probenvorbereitung, des Pipettierens von Reagenzien und des Waschens von Mikroplatten überflüssig machen und die Reproduzierbarkeit Ihrer Ergebnisse verbessern. Ein automatisierter ELISA-Workflow kann mit Kontrollsoftware und -komponenten kombiniert werden, wodurch skalierbare High-Throughput-Arbeitszellen entstehen.

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