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Lösungen zur Entwicklung von Zelllinien mit automatisiertem Klon-Screening

Der ClonePix® 2 Mammalian Colony Picker ist ein voll automatisiertes System zur Auswahl von hochwertigen Klonen in der Antikörper-Discovery und der Entwicklung von Zelllinien. Hybridoma, CHO-Zellen und andere Zelltypen werden aufgrund von benutzerdefinierten Parametern abgebildet und ausgewählt. Die Handhabung von Platten, das Auslesen von Barcodes und das Picken sind vollständig integriert. Alle Daten, einschließlich Abbildungen, werden für die Downstream-Analyse gespeichert. Der Picker erhöht die Wahrscheinlichkeit, eine optimal produzierende Zelllinie zu finden und verringert die Zeit und den Arbeitsaufwand erheblich.

  • Effizient-Icon

    Screenen Sie mehr Proben in kürzerer Zeit

    Der ClonePix 2 Picker ist 10x schneller als arbeitsintensive limitierende Verdünnungsreihen und FACS. Unsere hochentwickelte Software und die integrierte Robotik ermöglichen eine Pick-Geschwindigkeit von > 10.000 Klonen pro Tag.

  • Auswählen-Icon

    Wählen Sie Zellen mit wünschenswerten Eigenschaften aus

    Screenen und selektieren Sie Klone ganz einfach aufgrund ihrer Proteinproduktivität, Antigenspezifität, Zellviabilität und Expressionsniveaus markierter rekombinanter Proteine.

  • Genauigkeit-Icon

    Picken Sie Kolonien mit Präzision

    Pick-Genauigkeit < 1 mm. Robotisches Picken verringert das Risiko der Beeinträchtigung von Kolonien. Abbildungen der gepickten Klone werden zusammen mit den Daten gespeichert.

ClonePix 2 System

Clonepix 2

Merkmale

  • Umfang-Icon

    Mehrere Detektionsmethoden

    Die Morphologie, Größe und Nähe der Klone werden durch Weißlicht identifiziert und gemessen. Die Fluoreszenz zeigt Expressionsniveaus und/oder Spezifität an. Für das Multiplexing sind bis zu fünf Fluoreszenzfilter verfügbar.

  • Sterilität-Icon

    Aufrechterhaltung der Sterilität

    Eine ganze Reihe von Sterilitätsfunktionen und -optionen, darunter eine UV-Licht-Anwendung zur Desinfektion des Instrumenteninneren, sowie die Nadelreinigung und Halogentrocknung gehören zum Standard.

  • Konnektivität-Icon

    Integrierte Plattenaufbewahrung

    Beinhaltet zwei Aufbewahrungsstapel für Quell- und Zielplatten, jeder mit einer Kapazität von 10 Platten.

  • Auswahl-Icon

    Getrennte Koloniebildung

    Halbfestes CloneMediaTM fördert das Wachstum von Zellen zu getrennten Kolonien und macht einfaches Plattieren möglich. Die Medien ermöglichen es, dass eine höhere Dichte an Klonen gescreent werden kann.

  • Effizient-Icon

    Tierprodukt-freie Medien und Reagenzien

    Das CloneMedia Zellkulturmedium ist chemisch definiert und Tierprodukt-frei, und optimiert, um die Produktivität zu erhöhen, und die Visualisierung sekretierter Antikörper zu unterstützen, wenn es zusammen mit dem CloneDetectTM Nachweisreagenz verwendet wird.

  • Automatisierung-Icon

    Benutzerdefinierte Automatisierungsoptionen*

    Das Team für Technische Lösungen mit fortschrittlichem Workflow kann das Monoklonalitäts-System benutzerdefiniert anpassen und bietet zusätzlichen Service wie die integrierte Verifizierung der Monoklonalität.

*Preis, Lieferungszeit und Spezifikationen variieren aufgrund beiderseits abgesprochener technischer Anforderungen. Die Lösungsanforderungen können zu Anpassungen der Standardleistung führen.
 

Anwendungen für den ClonePix 2 Mammalian Colony Picker

  • Zelllinienentwicklung

    Entwicklung von Zelllinien für rekombinante Proteine

    Die Entwicklung von Zelllinien ist ein wesentlicher Schritt im Prozess der Erzeugung biopharmazeutischer Moleküle wie z. B. monoklonaler Antikörper. Der Prozess beginnt meistens mit der Transfektion des Wirtszelltyps mit DNA, die das therapeutische Protein von Interesse kodiert. Eine zufällige oder gezielte Integration der Ziel-DNA in das Genom der Wirtszelle wird so ermöglicht. Tausende von Klonen werden überprüft, um dann die wenigen zu isolieren, die große Mengen produzieren – ein manueller und zeitaufwendiger Prozess.

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    Screening auf Zelloberflächenexpression

    Screening auf Zelloberflächenexpression

    Viele Proteine, die auf der Oberfläche von Zellen exprimiert werden, sind Zielmoleküle bei der Entdeckung und Entwicklung von Biopharmazeutika. Die G-Protein-gekoppelten Rezeptoren (GPCRs) bilden zum Beispiel die größte Klasse von Zelloberflächen-Proteinen und sind Zielantigene für fast 40 % der bereits existierenden Wirkstoffe. Hochwertige Klone mit einer verstärkten GPCR-Expression an der Zelloberfläche in einem Pool aus transfizierten Zellen zu finden und zu selektieren kann eine Herausforderung sein. Das ClonePix 2 System stellt eine automatisierte Methode zum Screening großer Zellpopulationen dar, das die Wahrscheinlichkeit erhöht, einen seltenen, mit hoher Affinität bindenden oder einen hoch produktiven Klon zu finden.

  • Screening auf Produktivität von Klonen und Titer

    Screening auf Produktivität von Klonen und Titer

    Eine wichtige Komponente in der Identifizierung hochwertiger Klone ist die Bestimmung der Produktivität der aus einer einzigen Zelle gewonnenen Kolonie. Das Screening auf Produktivität mit traditionellen Ansätzen ist arbeits- und zeitintensiv. Allgemein besteht der Prozess aus mehreren Schritten, darunter die Isolation einzelner Zellen aus limitierenden Verdünnungsreihen, gefolgt von der Bestimmung des Titers mittels ELISA. Das ClonePix 2 System vereinigt die Selektion von Phänotypen, die Isolation von Einzelzellen und das Produktivität-Screening in einem einzigen Schritt, wodurch erheblich kürzere Screening-Zeiten und eine höhere Anzahl an Kandidaten erzielt werden.

    Hybridoma-Screening

    Hybridoma-Screening

    Antikörper-Discovery bezieht sich in der Regel auf das Screening und die Identifizierung von monoklonalen Antikörpern (mAbs), die zur Diagnose und Behandlung von Krankheiten gegen ein spezifisches Epitop gerichtet sind. Ein gängiger Ansatz bei der Generierung von monoklonalen Antikörpern umfasst die Fusion prämitotischer Krebszellen mit postmitotischen und terminal differenzierten Antikörper-exprimierenden B-Zellen aus der Milz. Die daraus resultierende fusionierte Zelle wird Hybridoma genannt und bietet die Vorteile, mAbs zu produzieren und sich gleichzeitig durch Teilung selbst zu erneuern. Das Screening von Hybridomas auf ihre Bindespezifität oder Produktivität kann mit dem ClonePix 2 System automatisiert werden.

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  • Monoklonale-Antikörper-Discovery

    Antigenspezifisches Screening

    Antikörper-Discovery bezieht sich in der Regel auf das Screening und die Identifizierung spezifischer Antikörper, die zum Zweck der Diagnose und Behandlung von Erkrankungen an ein Zielantigen-Molekül binden. Die Spezifität des Antikörpers basiert auf seiner Fähigkeit, das Epitop, einen einzigartigen Bereich auf einem Antigenmolekül, zu binden. Therapeutische Antikörper sind typischerweise monoklonal, wurden aus einzelnen Zellen gewonnen und sind gegen eine einzige Epitopregion auf dem Antigen gerichtet. Das ClonePix 2 System automatisiert das Screening und das schnelle Auffinden von Antigen-spezifischen Klonen in einer heterogenen Population von Zellen.

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    Monoklonalität

    Die Entwicklung von Zelllinien und die Sicherstellung der Monoklonalität sind entscheidende Schritte im Herstellungsprozess biopharmazeutischer Moleküle, wie z. B. monoklonaler Antikörper. Eine Zelllinie kann nach der Isolierung einer einzigen überlebensfähigen Zelle, die das Protein von Interesse robust exprimiert, etabliert werden. Ein entscheidender Meilenstein in diesem Prozess ist die Dokumentation des Nachweises der Klonalität. Die Dokumentation der Klonalität basiert üblicherweise auf Abbildungen, wobei eine Aufnahme einer einzelnen Zelle erstellt und in die Zulassungsunterlagen mit aufgenommen wird.

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Technische Daten und Optionen für den ClonePix 2 Mammalian Colony Picker

Ressourcen für den ClonePix 2 Mammalian Colony Picker

Präsentationen
Videos und Webinare
Entwicklung und Erzeugung stabiler Zelllinien

Arbeitsablauf zur Entwicklung einer stabilen Zelllinie

Arbeitsablauf für Hybridome

Arbeitsablauf für Hybridome

mammalian cells secreting non-mAb proteins workflow

Arbeitsablauf zur Selektion hochproduktiver Säugetierzellen, die nicht-mAb-Proteine sezernieren – SynBioBeta Blitzvortrag

Schnelle Identifizierung von neutralisierenden Antikörpern

Optimierter Arbeitsablauf zur schnellen Identifizierung von neutralisierenden Antikörpern gegen virale Partikel

Auswahl GPCR-Zelllinie

Identifikation und Selektion von GPCR-Zelllinien mit dem ClonePix 2

ClonePix 2 System

Clonepix 2

  • Citation
    Dated: Dec 01, 2017
    Publication Name: Journal of Immunological Methods

    Sequential screening by ClonePix FL and intracellular staining facilitate isolation of high producer cell lines for monoclonal antibody manufacturing

    Screening and characterization of cell lines for stable production are critical tasks in identifying suitable recombinant cell lines for the manufacture of protein therapeutics. To aid this essential function we have developed a methodology for the selection of antibody expressing cells using fluorescence based ClonePix FL colony isolation and… View more

    Screening and characterization of cell lines for stable production are critical tasks in identifying suitable recombinant cell lines for the manufacture of protein therapeutics. To aid this essential function we have developed a methodology for the selection of antibody expressing cells using fluorescence based ClonePix FL colony isolation and flow cytometry analysis following intracellular staining for immunoglobulin G (IgG). Our data show that characterization of cells by flow cytometry early in the clone selection process enables the identification of cell lines with the potential for high productivity and helps to eliminate unstable cell lines. We further demonstrate a correlation between specific productivity (qP) and intracellular heavy chain (HC) content with final productivity. The unique combination of screening using ClonePix FL and the flow cytometry approaches facilitated more efficient isolation of clonal cell lines with high productivity within a 15 week timeline and which can be applied across NS0 and CHO host platforms. Furthermore, in this study we describe the critical parameters for the ClonePix FL colony based selection and the associated calculations to provide an assessment of the probability of monoclonality of the resulting cell lines.

    Contributors: Gargi Roya, Guillermo Miro-Quesadab, Li Zhuanga, Tom Martina, Jie Zhub, Herren Wua, Marcello Marellia, Michael A.Bowena  
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  • Citation
    Dated: Dec 14, 2015
    Publication Name: 24th European Society for Animal Cell Technology (ESACT) Meeting: C2P2: Cells, Culture, Patients, Products

    CHO-DHFR cell line development platform: Application of Clonepix and Automated Mini Bioreactor (AMBR) technologies to meet accelerated timelines

    The Holy Grail sought by all Bioprocess Cell Line Development (CLD) groups is achieving high yields from easily-cultured, robustly-growing cells in timelines measured in weeks rather than months. As the first bottleneck in process development, CLD must first birth its product for upstream and downstream groups to initiate their own reproductive… View more

    The Holy Grail sought by all Bioprocess Cell Line Development (CLD) groups is achieving high yields from easily-cultured, robustly-growing cells in timelines measured in weeks rather than months. As the first bottleneck in process development, CLD must first birth its product for upstream and downstream groups to initiate their own reproductive cycles. To facilitate shortened CLD timelines, scientists have turned to new technologies and automation platforms. Emerging high-throughput instrumentation such as Clonepix and Automated MicroBioreactors (AMBR) have been enthusiastically integrated into stable cell line generation platforms; however, application of these methodologies among users is divergent.

    Contributors: Venkata R Mangalampalli, Dyane Wycuff, Mingzhong Chen, David Berlinger, Elizabeth H Scheideman, Amritha Menon, Guilia Fabozzi, Althaf Hussain & Richard M Schwartz  
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  • Citation
    Dated: May 25, 2014
    Publication Name: New Biotechnology

    High-throughput ClonePix FL analysis of mAb-expressing clones using the UCOE expression system

    Therapeutic recombinant monoclonal antibodies (mAbs) are commonly produced by high-expressing, clonal, mammalian cells. Creation of these clones for manufacturing remains heavily reliant on stringent selection and gene amplification, which in turn can lead to genetic instability, variable expression, product heterogeneity and prolonged development… View more

    Therapeutic recombinant monoclonal antibodies (mAbs) are commonly produced by high-expressing, clonal, mammalian cells. Creation of these clones for manufacturing remains heavily reliant on stringent selection and gene amplification, which in turn can lead to genetic instability, variable expression, product heterogeneity and prolonged development timelines. Inclusion of cis-acting ubiquitous chromatin opening elements (UCOE™) in mammalian expression vectors has been shown to improve productivity and facilitate high-level gene expression irrespective of the chromosomal integration site without lengthy gene amplification protocols. In this study we have used high-throughput robotic clone selection in combination with UCOE™ containing expression vectors to develop a rapid, streamlined approach for early-stage cell line development and isolation of high-expressing clones for mAb production using Chinese hamster ovary (CHO) cells. Our results demonstrate that it is possible to go from transfection to stable clones in only 4 weeks, while achieving specific productivities exceeding 20 pg/cell/day. Furthermore, we have used this approach to quickly screen several process-crucial parameters including IgG subtype, enhancer-promoter combination and UCOE™ length. The use of UCOE™-containing vectors in combination with automated robotic selection provides a rapid method for the selection of stable, high-expressing clones.

    Contributors: Jeff Jia Cheng Hou, Ben S. Hughes, Matthew Smede, Kar Man Leung, Kara Levine, Susan Rigby, Peter P. Gray, Trent P.Munro  
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Zugehörige Produkte und Service für den ClonePix 2 Mammalian Colony Picker