Im Verlauf der letzten drei Jahrzehnte ist der ELISA, bzw. Enzyme-Linked Immunosorbent Assay, ein zentraler Bestandteil vieler Forschungsgebiete geworden. Er hat sich für viele Anwendungen als nützlich herausgestellt – vom Nachweis von Kontaminationen in Lebensmitteln und …

ELISA-Übersicht

ELISA ist eine Methode zum quantitativen Nachweis eines Antigens (d. h. Toxin oder Fremdsubstanz) in einer Probe. Die meisten ELISAs werden auf Mikroplatten durchgeführt, wobei der Boden der Mikroplatte als feste Oberfläche dient, an die ein Antigen von Interesse entweder direkt oder über einen Antikörper bindet. ELISA-Mikroplatten-Reader werden üblicherweise von Forschern verwendet, um mehrere Platten gleichzeitig zu lesen und zu analysieren und genaue ELISA-Messungen bei hohem Durchsatz zu erhalten.

Wie also hat alles angefangen? Hier erforschen wir den Ursprung des ELISA und wie er sich im Laufe der Jahre weiterentwickelt hat, um zu einigen der bedeutendsten wissenschaftlichen Durchbrüche unserer Zeit beizutragen.

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ELISA-Zeitleiste

1941 – Albert H. Coons und seine Kollegen sind die ersten, die Antikörper mit einem Fluoreszenzfarbstoff markieren und diesen verwenden, um Antigene in Gewebeschnitten zu identifizieren. Diese Methode wird heute als Immunfluoreszenz bezeichnet. ¹

1960 – Der Radioimmunoassay wird in einem wissenschaftlichen Artikel von Rosalyn Sussman und Solomon Berson beschrieben. Aufgrund der Radioaktivität, die potenzielle Gesundheitsprobleme darstellte, benötigten Forscher jedoch eine sicherere Alternative.²

1971 – Eva Engvall und Peter Perlman erfinden (unabhängig) eine Methode, die die Medizin revolutioniert, den ELISA-Test. Bei dieser Methode werden Antikörper verwendet, um das Vorhandensein von Hormonen oder Viren zu untersuchen.^3,4

1976 – Die kompetitive ELISA-Methode, bei der ein konjugiertes Substrat mit einem Protein von Interesse konkurriert, wird entwickelt und verwendet, um das humane Choriogonadotropinhormon nachzuweisen.⁵

1977 – Die Sandwich-ELISA-Methode, bei der der Nachweisantikörper auf die Plattenoberfläche aufgetragen wird, bevor das zu untersuchende Protein hinzugefügt wird, wird auf mehreren Substraten entwickelt und auf Machbarkeit getestet.⁶

1978 – Der ndirekte ELISA, in dem ein sekundärer Antikörper zu Nachweiszwecken hinzugefügt wird, wurde entwickelt und zum Nachweis von Humanserumalbumin verwendet.⁷

1985 – Der ELISA-Test ist der erste Screening-Test, der üblicherweise für HIV eingesetzt wird. Es wurde für die Verwendung auf zugelassen2. März 1985.⁹

HEUTE – ELISA wird verwendet, um als Reaktion auf eine globale Pandemie, die zum vollständigen Stillstand mehrerer Länder führte, Antikörper gegen SARS-CoV-2 (COVID-19) zu testen.

Erfahren Sie mehr über die verschiedenen ELISA-Techniken, ihre verschiedenen Anwendungen und die ELISA-Kits, Plattenreader, Wascher und Software, die für die Durchführung eines Hochdurchsatz-ELISA-Assays erforderlich sind.

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Quellenangaben

1. Coons, A. H. Die Anfänge der Immunfluoreszenz. J. Immunol . 87, 499–503 ( 1961).Coons, A. H. Die Anfänge der Immunfluoreszenz. J. Immunol . 87, 499–503 (1961).
2. Yalow, Rosalyn und Berson, Solomon. „Immunoassay von endogenem Plasmainsulin beim Menschen.“ Das Journal of Clinical Investigation . 1960;39: 1157–75.Yalow, Rosalyn und Berson, Solomon. „Immunoassay von endogenem Plasmainsulin beim Menschen.“ Das Journal of Clinical Investigation . 1960;39: 1157–75.
3. Perlmann, Peter et al. „Enzyme-linked Immunosorbent Assay (ELISA) quantitativer Assay für Immunglobulin G.“ Immunchemie . 1971;8 (9): 871–4.Perlmann, Peter et al. „Enzyme-linked Immunosorbent Assay (ELISA) quantitativer Assay für Immunglobulin G.“ Immunchemie . 1971;8 (9): 871–4.
4. Schuurs, A. „Immunoassay mit Antigen-Enzym-Konjugaten“. FEBS-Buchstaben . 1971;15 (3): 232–236.Schuurs, A. „Immunoassay mit Antigen – Enzymkonjugaten“. FEBS-Briefe . 1971;15 (3): 232–236.
5. Yorde, Donald et al. „Konkurrenzfähiger enzymgebundener Immunoassay mit der Verwendung löslicher Enzym-/Antikörper-Immunkomplexe für die Kennzeichnung. I. Messung von humanem Choriogonadotropin.“ Klin. Chem . 1976;22/8,1372–1377 Yorde, Donald et al. „Wettbewerbsfähiger Enzym-gebundener Immunoassay mit der Verwendung von löslichen Enzym-/Antikörper-Immunkomplexen für die Kennzeichnung. I. Messung von humanem Choriogonadotropin.“ Klin. Chem. 1976;22/8,1372–1377
6. Kato, K et al. „Verwendung von Kaninchen-Antiboty-IgG, das für den enzymgebundenen Sandwich-Immunoassay an die Glasoberfläche von Plain und Aminoalkylsilyl gebunden ist.“ J Biochem . 1977 Jul;82(1):261–6.Kato, K et al. „Verwendung von Kaninchen-Antiboty-IgG, das für den enzymgebundenen Sandwich-Immunoassay an die Glasoberfläche von Plain und Aminoalkylsilyl gebunden ist.“ J Biochem . 1977 Juli;82(1):261–6.
7. Lindström, P et al. „IgG-Autoantikörper gegen Humanserumalbumin, untersucht durch die ELISA-Technik.“ Gescanntes J-Immunol . 1978;7(5):419-25.Lindström, P et al. „IgG-Autoantikörper gegen Humanserumalbumin, untersucht mittels ELISA-Technik.“ Gescanntes J-Immunol . 1978;7(5):419-25.
8. Czerkinsky, C et al. „Ein Festphasen-Enzyme-linked Immunospot (ELISPOT)-Assay zur Auszählung spezifischer Antikörper-sezernierender Zellen.“ J Immunol-Methoden. 1983;65 (1– 2): 109–121.Czerkinsky, C et al. „Ein Festphasen-Enzyme-linked Immunospot (ELISPOT)-Assay zur Auszählung spezifischer antikörpersezernierender Zellen.“ J Immunol Methods. 1983;65 (1–2): 109–121.
9. Alexander, Thomas. „Diagnostiktest auf das humane Immundefizienzvirus: 30 Jahre der Evolution.“ Klinische Immunologie und Impfstoffimmunologie . 2016 Apr;23(4):249-253.Alexander, Thomas. „Human Immunodeficiency Virus Diagnostic Testing: 30 Years of Evolution“. Klinische Immunologie und Impfstoffimmunologie . 2016 Apr;23(4):249-253.

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