DispenCell Single-Cell Dispenser

Zelllinienentwicklung

Die Entwicklung von Zelllinien ist ein wesentlicher Schritt im Prozess der Erzeugung biopharmazeutischer Moleküle wie z. B. monoklonaler Antikörper. Der Prozess beginnt meistens mit der Transfektion des Wirtszelltyps mit DNA, die das therapeutische Protein von Interesse kodiert. Eine zufällige oder gezielte Integration der Ziel-DNA in das Genom der Wirtszelle wird so ermöglicht. Tausende von Klonen werden überprüft, um dann die wenigen zu isolieren, die große Mengen produzieren – ein manueller und zeitaufwendiger Prozess.

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Monoklonale Antikörper (mAbs)

Monoklonale Antikörper (mAb) stammen von einer einzigen Elternzelle ab und binden daher ausschließlich an ein einziges Epitop. Der Begriff „Monoklonale-Antikörper-Discovery“ bezieht sich in der Regel auf das Screening und die Identifizierung von spezifischen Antikörpern, die zum Zweck der Diagnose und Behandlung von Krankheiten gegen ein spezifisches Epitop gerichtet sind, wie gegen ein Coronavirus-Epitop bei der COVID-19-Erkrankung.

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Monoklonalität

Die Entwicklung von Zelllinien und die Sicherstellung der Monoklonalität sind entscheidende Schritte im Herstellungsprozess biopharmazeutischer Moleküle, wie z. B. monoklonaler Antikörper. Eine Zelllinie kann nach der Isolierung einer einzigen überlebensfähigen Zelle, die das Protein von Interesse robust exprimiert, etabliert werden. Ein entscheidender Meilenstein in diesem Prozess ist die Dokumentation des Nachweises der Klonalität. Die Dokumentation der Klonalität basiert üblicherweise auf Abbildungen, wobei eine Aufnahme einer einzelnen Zelle erstellt und in die Zulassungsunterlagen mit aufgenommen wird.

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Einzelzellgenomik

Die Isolierung einzelner Zellen stellt in der Einzelzellgenomik nach wie vor eine große Herausforderung dar. Die derzeitigen Methoden liefern keine Beweisführung, dass nur eine Einzelzelle in das Analysegefäß vereinzelt wurde. Wichtig ist, die Unversehrtheit der Zellen vor der Lyse aufrechtzuerhalten, um die DNA zu schonen.

Weiterhin sollten die Zellen vor ihrer Lyse so wenig Stress wie möglich ausgesetzt sein, um ihre RNA und deren Expressionslevel beizubehalten. Die CloneSelect Single-Cell Printer Serie setzt einzelne Zellen auf eine sehr schonende Art und Weise ab und garantiert dadurch hohe Reinheit und Überlebensfähigkeit.

Das stellt die optimale Basis für nachfolgende Einzelzell-Genomanalysen dar.

Einzelzellsortierung

Die Entwicklung von Zelllinien erfordert das Auffinden einzelner aus Zellen hervorgegangener Klone, die hohe und gleichbleibende Mengen des therapeutischen Zielproteins herstellen. Der erste Schritt in diesem Prozess ist die Isolierung einzelner, überlebensfähiger Zellen. Die limitierende Verdünnungsreihe ist eine Technik, die sich auf statistische Wahrscheinlichkeit stützt, jedoch zeitraubend ist. Der DispenCell™ Single-Cell Dispenser ermöglicht eine schnelle, einfache und schonende Isolierung von Zellen sowie einen sofortigen Nachweis der Klonalität und die Zurückverfolgung nach der Zelldispension.

• Broschüre: DispenCell Single-Cell Dispenser