SPHÄROIDE KULTIVIEREN
Um die typische kugelförmige Form der Sphäroide zu entwickeln, können 3D-Zellen direkt in einer ULA (ultra-low attachment) Rundbodenplatte kultiviert werden. Vor der Überführung auf eine Imaging-Mikroplatte können die Zellen auch in anderen Laborgefäßen wie Petrischalen, Kulturflaschen oder anderen Mikroplatten gezogen werden.
96- oder 384-Well-Platten
Die meisten 3D-Zellkulturen werden für das High-Content-, High-Throughput-Screening in 96- oder 384-Well-Mikroplatten kultiviert. ULA, U-förmige/Rundboden-Mikroplatten ermöglichen es der kugelförmigen Form, Sphäroide zu bilden. Die Sphäroide können jedoch auch in einer Flachboden-Mikroplatte kultiviert werden, wobei Hydrogele verwendet werden, um extrazelluläre Matrices (EZM) zu simulieren. Optimierte Sphäroid-Zellkultur-Protokolle für das ImageXpress® Micro Confocal High-Content Imaging System können mit ULA, U-Boden 96- und 384-Well-Platten und einem OneStep-Färbeprozess abgearbeitet werden und so die Assay-Dauer und -Variabilität verringern.
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BEHANDLUNG MIT VERBINDUNGEN
Nachdem die Sphäroide ausgebildet sind, werden Verbindungen zu den Wells hinzugefügt und für einen oder mehrere Tage inkubiert, je nachdem, welcher Mechanismus untersucht wird. Im Allgemeinen werden für Apoptose-Studien kürzere und für Zytotoxizitäts-Studien mit mehreren Parametern längere Inkubationszeiten angewendet. Bei Behandlungen mit Wirkstoffen, die über längere Zeit andauern, werden die Verbindungen während der Inkubation regelmäßig erneuert. Die Konzentration der Verbindungen und die Inkubationszeiten sind vom gewünschten Protokoll abhängig.
AUF MARKER FÄRBEN
Nachdem die Behandlung mit Verbindungen abgeschlossen ist, werden die Farbstoffe direkt zum Medium hinzugegeben. Um eine Störung der Sphäroide zu vermeiden, können Färbungen angewendet werden, die keinen Waschschritt erfordern. Sphäroide können, wenn notwendig, jedoch auch vorsichtig gewaschen werden, sogar automatisiert.
Assay-Kits
Benutzerfreundliche, robuste Assay-Kits für die Life Science-Forschung, Wirkstoffforschung und Wirkstoffentwicklung, und für Bioassays. Unsere Assay-Kits sind für die Verwendung mit unseren Instrumenten optimiert. Screenen Sie mehr Verbindungen zu früheren Zeitpunkten in der Wirkstoffentwicklung und ermöglichen Sie für Testverbindungen die Beschreibung eines vollständigen Konzentrations-Antwort-Profils für die Zellviabilität, Proliferation, Axiogenese und mehr.
High-Content Imaging-System
Das ImageXpress Micro Confocal System ist eine einzigartige konfokale Imaging-Lösung, die pro Woche mehr als eine Million Wells ablichten kann. Die MetaXpress Software ermöglicht die Aufnahme von 3D-Z-Stapeln. Bilder der Z-Ebene können einzeln oder durch die Anwendung eines mathematischen Algorithmus zu einer einzigen 2D-Projektionsabbildung zusammengefügt und abgespeichert werden.
NEHMEN SIE 3D-ZELLBILDER AUF
Durch die Anwendung einer spezialisierten Imaging-Ausrüstung können Bilder vom Inneren des Sphäroid-Körpers einzeln oder als ein Z-Stapel (mehrere Bilder in verschiedenen Tiefen) aufgenommen werden.
ANALYSIEREN SIE 3D-ZELLBILDER
Nutzen Sie eine Software zur zellulären Imaging-Analyse, um Zellbilder quantitativ zu analysieren und um zu beobachten und zu beurteilen, wie Zellen verschiedene Marker exprimieren, und um biologische Messungen zu quantifizieren.
Software für High-Content-Imaging
Die MetaXpress High-Content Image Acquisition and Analysis Software ist ein Multi-Level-Analysewerkzeug für eine große Bandbreite von 2D- und 3D-Anwendungen, das für das ImageXpress Micro Confocal System optimiert wurde. Die integrierten Aufnahmemodule für die Aufnahme und Analyse von 3D-Zellmodellen vereinfachen die Hoch-Durchsatz-Quantifizierung von 3D-Strukturen mit Volumen-, Intensitäts- und Distanzmessungen.