EarlyTox Zellviabilitäts-Assay-Kits
Die EarlyTox™ Assay-Kits zur Messung der Lebensfähigkeit von Zellen sind eine Reihe fluoreszenzbasierter Reagenzien für die Beurteilung der Lebensfähigkeit von Zellen, der Zellproliferation und verschiedener Apoptose-Ereignisse mithilfe von Säugerzelllinien. Diese Assay-Kits sind für die Verwendung mit Mikroplatten-Readern optimiert und bedienen sich homogener Assay-Protokolle ohne Wäsche, die eine Beschreibung eines umfassenden Konzentrations-Reaktions-Profils von Testverbindungen ermöglichen.
EarlyTox Zellviabilitäts-Assay-Kits
Assays zur Bestimmung der Lebensfähigkeit von Zellen finden in vielen Forschungsgebieten Anwendung, von der Untersuchung der Mechanismen des Zelltods bis hin zur Entwicklung neuer Therapeutika gegen Apoptose bei Krankheiten. Fluoreszenz-Mikroplatten-Reader gehören zu den gängigsten Technologien zur Detektion der Lebensfähigkeit von Zellen. Die EarlyTox Cell Viability Assay Kits wurden für eine hochempfindliche und präzise Mikroplatten-Detektion optimiert, die eine Komplettlösung für die Überwachung der Überlebensfähigkeit von Zellen liefert.
- Optimale Datenqualität für Mikroplatten-Reader-Assays
- Vereinfachtes homogenes Versuchsprotokoll
- Vorkonfigurierte SoftMax Pro Software-Protokolle
EarlyTox™ Lebend/Tot-Assay-Kit
Dieses Kit ermöglicht die Detektion lebender und toter Populationen von Säugerzelllinien auf Grundlage der Integrität der Zellmembran unter Verwendung eines Fluoreszenz-Mikroplatten-Readers. Calcein-AM ist ein gängiger Lebendzellmarker. Das nicht-fluoreszente Calcein-AM durchdringt die intakte Zellmembran und wird von intrazellulären Esterasen in fluoreszentes Calcein überführt. Die Intensität der grünen Fluoreszenz im Zytosol (Anregung bei 495 nm und Emission bei 530 nm) gibt daher Aufschluss über die Zahl der Lebendzellen. EthD-III ist praktisch nicht-fluoreszent und dringt bei intakter Plasmamembran nicht in die Zelle ein. Bei einer Beeinträchtigung der Integrität der Zellmembran, wie es beim Tod einer Zelle der Fall ist, gelangt EthD-III jedoch in die Zelle und bindet an Nukleinsäuren, was eine leuchtend rote Fluoreszenz in toten Zellen ergibt (Anregung bei 530 nm und Emission bei 645 nm).
EarlyTox™ Lebendzell-Assay-Kit
Dieses Kit ermöglicht die Detektion lebender Populationen von Säugerzelllinien mithilfe eines Fluoreszenz-Mikroplatten-Readers auf Grundlage der Integrität der Zellmembran und der Aktivität intrazellulärer Esterasen. Calcein-AM ist ein gängiger Lebendzellmarker. Das nicht-fluoreszente Calcein-AM durchdringt die intakte Zellmembran und wird von intrazellulären Esterasen in fluoreszentes Calcein überführt. Die Intensität der grünen Fluoreszenz im Zytosol (Anregung bei 495 nm und Emission bei 530 nm) gibt daher Aufschluss über die Zahl der Lebendzellen. Außerdem ermöglicht die niedrige zelluläre Toxizität von Calcein AM die Langzeitnachverfolgung von Zellen sowie Zellproliferations-Assays.
EarlyTox™ Caspase-3/7 R110 Assay-Kit
Dieses Kit ermöglicht die Analyse der Apoptose auf Grundlage der Caspase-3/7-Aktivität und ihrer Konsens-Targetsequenz Asp-Glu-Val-Asp (DEVD). Caspase-3 und Caspase-7 sind Proteasen, die während der Ausführungsphase von Apoptose aktiviert werden. Dieses Kit ermöglicht die Durchführung eines homogenen Ein-Schritt-Assays, der speziell für Mikroplatten-Reader ausgelegt ist. Das fluorogene Substrat (Ac-DEVD)2-R110 enthält zwei DEVD-Konsensus-Zielsequenzen und wird von den Enzymen im Zelllysat vollständig hydrolysiert. Durch die Hydrolyse beider DEVD-Peptide wird der grüne Fluoreszenzfarbstoff R110 freigesetzt, was zu einem starken Anstieg der Fluoreszenz führt (Anregung bei 490 nm und Emission bei 520 nm). Das Assay-Kit enthält außerdem den kompetitiven Caspase-3/7-Inhibitor Ac-DEVD-CHO als Negativkontrolle. Außerdem wird R110 zur Erstellung einer Standardkurve zur Quantifizierung der Caspase-3-Aktivität bereitgestellt.
EarlyTox™ Caspase-3/7 NucView 488 Assay Kit und EarlyTox™ Caspase-3/7-D NucView 488 Assay Kit
Dieses Kit ermöglicht die Apoptoseerkennung in Populationen intakter Zellen auf Grundlage der Messung der Caspase-3/7-Aktivität unter Verwendung eines Fluoreszenz-Mikroplatten-Readers oder eines Fluoreszenz-Imaging-Systems. Caspase-3 und Caspase-7 sind Proteasen, die während der Ausführungsphase von Apoptose aktiviert werden. Die Detektion der Caspase-3/7-Aktivität in intakten Zellen erfolgt mithilfe des NucView 488 Caspase-3-Substrats (in DMSO oder phosphatgepufferter Salzlösung (PBS) für das EarlyTox Caspase-3/7-D NucView 488 Assay-Kit bzw. das EarlyTox Caspase-3/7 NucView 488 Assay-Kit) ohne Beeinflussung der Caspase-Aktivität. Das Substrat besteht aus einem fluorogenen DNA-Farbstoff, der mit der DEVD-Erkennungssequenz von Caspasen-3/7 gekoppelt ist. Das zunächst nicht-fluoreszente Substrat durchdringt die Plasmamembran und gelangt so ins Zytoplasma. In apoptotischen Zellen wird das Substrat von Caspasen-3/7 gespalten, wodurch ein DNA-Farbstoff mit hoher Affinität freigesetzt wird, der in den Zellkern wandert und die DNA mit leuchtend grüner Fluoreszenz anfärbt (Anregung bei 500 nm und Emission bei 530 nm). Mit NucView 488 gefärbte Zellen sind mit Formaldehyd fixierbar und für eine anschließende Immunfärbung geeignet. Das Assay-Kit enthält ein optionales Maskierungsreagenz, um die gegebenenfalls vorhandene Hintergrundfluoreszenz zu reduzieren. Für DMSO-empfindliche Zellen wird die PBS-Rezeptur empfohlen.