Hybridomerzeugung und Screening großer Antikörperbibliotheken
Die Hybridom-Technologie ist eine Methode zur Massenproduktion von Antikörpern in einer Hybridzelllinie, die durch die Fusion einer Antikörper-produzierenden B-Zelle mit einer immortalisierten Myelomzelllinie erzeugt wurde, und nun als Hybridomzelle bezeichnet wird. Weil jede B-Zelle einen einzigartigen Antikörper produziert, kann die Klonierung einzelner Hybridome genutzt werden, um im großen Maßstab eine vielfältige Bibliothek mit einzigartigen monoklonalen Antikörpern zu erzeugen, die sehr häufig für die Prävention, Diagnose und Behandlung von Erkrankungen eingesetzt werden.
In diesem Video, präsentiert Justin Dranschack, Manager, BioPharma Platform, unsere Lösung für einen Arbeitsablauf für Hybridome und verweist auf die Systeme, die Sie bei Ihrer Forschung unterstützen.
Arbeitsablauf für Hybridome
Schritt 1: Fusion
Der Prozess, eine B-Zelle, die einen einzigartigen Antikörper produziert, mit einer Myelomzelle zu fusionieren und dadurch eine Hybridzelllinie zu erzeugen, wird Fusion genannt.
Schritt 2: Klon-Screening
Die Identifizierung von Zelllinien, die von Klonen abstammen und die große Mengen monoklonaler Antikörper produzieren.
Schritt 3: Zellwachstum
Das Zellwachstum wird bestimmt, indem die Zellteilungen über einen vorgegebenen Zeitraum hinweg mittels labelfreiem Imaging beobachtet werden.
Schritt 4: Spezifität und Kreuzreaktivität
Der Prozess, die Fähigkeit von Antikörpern zu analysieren, ausschließlich an ein Zielantigen zu binden.
Schritt 5: Bindungsaffinität und Internalisierung
Die Bindungsaffinität bezeichnet die Stärke der Bindungs-Wechselwirkung zwischen einem einzelnen Biomolekül (z. B. Protein oder DNA) und seinem Liganden / Bindungspartner (z. B. Wirkstoff oder Inhibitor). Die Internalisierung ist der Prozess, die Fähigkeit eines vorgegebenen Partikels, in die Zelle einzudringen, zu überprüfen.
Systeme zur Beschleunigung Ihrer COVID-19-Forschung
Seien Sie sofort einsatzbereit – mit bewährten Technologien
Molecular Devices ist in der Lage, Ihren Forschungsbedarf zu unterstützen, indem wir Technologien und Lösungen durch Expressabwicklung, Eilsendung und auf den Kunden zugeschnittene Finanzierungslösungen anbieten, falls diese für Mikroplatten-Reader, Biopharma und zelluläre Imaging-Systeme benötigt werden.
Unsere ImageXpress-Systeme bieten eine Komplettlösung für das High-Content-Screening und die Analyse. Alle unsere Systeme unterstützen eine große Bandbreite an Anwendungen, erhöhten Durchsatz und optimierte Arbeitsabläufe.
Unsere SpectraMax® Mikroplatten-Reader-Serie misst die Absorption, Fluoreszenz, Lumineszenz und zusätzlichen Detektionsmodi mit verfügbaren Upgrades für Western Blot, Zell-Imaging und schnelle Kinetik mit Injektoren. GMP/GLP-Labore können mit unserer SoftMax Pro GxP Compliance- und Validierungslösung den FDA-Richtlinien gerecht werden.
Die SoftMax® Pro 7.1.1 GxP Software ist mit ihren optimierten Arbeitsabläufen zur Sicherstellung der Datenintegrität die neueste und sicherste Software zur Umsetzung der vollen FDA 21 CFR Part 11-Konformität. Jeder einzelne Schritt ist zur Vereinfachung der Analyse und Berichterstellung für unsere Mikroplatten-Reader optimiert.
Die QPix™ 400 Series Microbial Colony Pickers kombinieren intelligente Bildanalyse mit präziser Automatisierung zum schnellen und effizienten Screening großer Bibliotheken. Mit der Fähigkeit, bis zu 3000 Kolonien pro Stunde zu picken, wird er Ihren Arbeitsablauf optimieren.
Der ClonePix™ 2 Mammalian Colony Picker ist ein voll automatisiertes System zur Auswahl von hochwertigen Klonen in der Antikörper-Discovery und der Entwicklung von Zelllinien.
Die CloneSelect™ Single-Cell Printer™ Serie setzt einzelne Zellen mittels einer patentierten, Tintendrucker-artigen wegwerfbaren Einwegkartusche schonend und mit großer Effizienz ab.
Der CloneSelect™ Imager ist eine automatisierte Hoch-Durchsatz-Lösung für das Imaging und die Analyse von Säugerzelllinien.
Unsere Wascher bieten Schnelligkeit und konfigurierbare Optionen – von der Ausgabe einzelner Röhrchen bis hin zum Waschen ganzer 96- und 384-Well-Platten.
Forschungslösungen rund um COVID-19
Beschleunigen Sie Ihre COVID-19-Forschung
Molecular Devices ist bestrebt, Wissenschaftler zu unterstützen, die an der zellulären Antwort auf COVID-19 und an der Impfstoffentwicklung forschen, indem wir Technologien und Lösungen liefern, die Sie schnell zum Einsatz bringen können.
Lösungen für Arbeitsabläufe in der Impfstoffentwicklung
Sehen Sie sich eine Vielfalt von Arbeitsabläufen rund um Viren an – von der Antigen-/Immunogen- und Antikörper-Discovery bis hin zur Entwicklung stabiler Zelllinien.
Anwendungen für maßgebliche Forschung
Erfahren Sie mehr darüber, wie unsere Technologie Sie bei Ihrer Erforschung von COVID-19 und anderer Infektionserkrankungen zum Zweck der Entwicklung von Impfstoffen, Therapeutika und Diagnostika unterstützen kann.
Unternehmensmitteilung
Während COVID-19 die Welt weiterhin in Atem hält, möchten wir sicherstellen, dass unsere Partner voll und ganz informiert darüber sind, wie Molecular Devices und Danaher Sie in dieser schwierigen Zeit weiterhin unterstützen.
Ressourcen rund um zelluläre Antworten gegen COVID-19 und Impfstoffentwicklung
Application Note
Ein auf Mikrofluidik basierender Arbeitsablauf für das Aussäen von Einzelzellen und das Imaging von Mikroplatten, optimiert auf Effizienz, Überlebensfähigkeit und die Dokumentation der Monoklonalität
A microfluidics-based, single cell printing and microplate imaging workflow optimized for efficiency, viability and monoclonality report generation
In dieser Application Note demonstrieren wir einen vereinheitlichten Arbeitsablauf, der das Absetzen einzelner Zellen und die Verifizierung der Klonalität kombiniert. Wir verbinden den Einsatz des SCP und des CSI, um einzelne Zellen in eine …
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Application Note
HTRF-Profiling-Service auf dem SpectraMax iD5 Multi-Mode Microplate Reader
HTRF profiling services on SpectraMax iD5 Multi-Mode Microplate Reader
Das Cisbio’s Custom Solutions Laboratory-Team hat mit Molecular Devices zusammengearbeitet, um relevante Daten zu erzeugen, die die Aktivität des kompetenten Profiling-Service, der von Cisbio US …
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Application Note
Messen Sie Gesamtprotein in Zelllysaten mit dem SpectraMax ABS Plus Microplate Reader
Measure total protein in cell lysates with SpectraMax ABS Plus Microplate Reader
Die Quantifizierung der Proteinkonzentrationen aus Zelllysaten ist ein wichtiger Schritt für viele Downstream-Anwendungen wie Western Blots und Enzyme-linked Immunosorbent Assays (ELISAs).
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Application Note
Optimieren Sie die BCA-basierte Proteinquantifizierung auf dem SpectraMax iD5 Reader
Streamline BCA-based protein quantitation on the SpectraMax iD5 reader
Erfahren Sie, wie eine zelluläre Proteinprobe mit den BCA Protein-Assay-Kits auf dem SpectraMax® iD5 Multi-Mode Mikroplatten- Reader quantifiziert werden kann.
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Application Note
Validieren Sie CRISPR-editierte Zellen mittels Imaging und Western Blot-Nachweis auf einem Mikroplatten-Reader
Validate CRISPR-Edited Cells using Imaging and Western Blot Detection on a Microplate Reader
Das Genomeditieren fand weitreichende Anwendung, um die Genexpression und die Funktion von Proteinen zu untersuchen. Aber viele dieser Methoden sind arbeitsintensiv und ungenau. Das CRISPR (Clustered Regularly Interspaced …
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Application Note
Komplette Lösung für den cAMP-Arbeitsablauf mit dem CatchPoint cAMP-Fluoreszenz-Assay-Kit
Complete cAMP workflow solution using the CatchPoint cAMP Fluorescent Assay Kit
G-Protein-gepaarte Rezeptoren (GPCR) sind wichtige Transmembranproteine, die extrazelluläre Signale in intrazelluläre Antworten übersetzen. Diese intrazellulären Antworten beziehen …
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Application Note
Verwendung des NanoOrange Protein Kit mit den SpectraMax Mikroplatten-Readern
Using the NanoOrange Protein Kit with SpectraMax Microplate Readers
Diese Application Note beschreibt, wie der NanoOrange® Protein Quantitation Kit von Life Technologies mit dem Fluoreszenz-Detektionsmodus der Molecular Devices SpectraMax® Microplate Reader und der SoftMax …
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Application Note
AlphaLISA Screen auf der SpectraMax Paradigm Multi-Mode Mikroplatten-Detektionsplattform
AlphaLISA Screen on the SpectraMax Paradigm Multi-Mode Microplate Detection Platform
Entzündungen, die Reaktion des Körpers auf Infektionen, Reizungen oder andere Verletzungen, sind von einer erhöhten Produktion endothelialer Chemokine und einer erhöhten Expression von Adhäsionsmolekülen begleitet, was zu …
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Application Note
Nukleinsäurequantifizierung und -analyse mit dem QuickDrop Spektrophotometer
Nucleic acid quantitation and analysis using the QuickDrop Spectrophotometer
Spektrophotometrie ist eine sehr etablierte Technik zur Quantifizierung und Analyse biologischer Substanzen. Nukleinsäuren sind eine der am häufigsten routinemäßig vermessenen Substanzen in Life …
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Application Note
Qualitative Messung von IgG-Antikörpern gegen das Spike-Protein und die Nukleokapsid-Proteine von SARS-CoV-2 in Serumproben.
Qualitative measurement of SARS-CoV-2 spike and nucleocapsid IgG antibodies in serum samples
Schnelle, präzise und häufig durchgeführte molekulare Tests sind für die Navigation durch die SARS-CoV-2(COVID-19)-Pandemie von entscheidender Bedeutung.
Quellennachweise
Quantifizierung neutralisierender Antikörper gegen SARS-CoV-2 durch Wildtyp-Plaque-Reduktions-Assays, Mikro-Neutralisationsassays und Pseudotypisierte-Virus-Neutralisations-Assays.
Quantification of SARS-CoV-2 neutralizing antibody by wild-type plaque reduction neutralization, microneutralization and pseudotyped virus neutralization assays
Virus-Neutralisations-Assays vermessen neutralisierende Antikörper im Serum und Plasma, und der Plaque-Reduktion-Neutralisierungs-Test (PRNT) wird als Goldstandard zur Titerbestimmung …
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Application Note
Vergleich traditioneller Klonierungsmethoden mit dem CloneSelect Single-Cell Printer f.sight unter Verwendung von CHO-Zelllinien, die bei der Herstellung monoklonaler Antikörper gebräuchlich sind
Comparison of traditional cloning methods vs. CloneSelect Single-Cell Printer f.sight using CHO cell lines commonly used for monoclonal antibody production
Da die Vorschriften für die Zelllinienentwicklung immer strenger werden, müssen Forscher Einzelzellklonierungen durchführen und Beweise liefern, dass eine Zelllinie …
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Application Note
Ein Arbeitsablauf, der die Isolation von Einzelzellen und das Mikroplatten-Imaging kombiniert, verbessert die Effizienz von Klonierungen bei verstärkter Sicherstellung der Klonalität
A workflow combining single-cell isolation and microplate imaging improves cloning efficiency with higher assurance of clonality
Die Isolation von Einzelzellen findet ein breites Spektrum an Anwendungsmöglichkeiten, von der Einzelzellgenomik bis hin zur Antikörper-Discovery und der Zelllinien-Entwicklung.
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Application Note
Bestimmen Sie die Zellviabilität und Zellproliferation mit kolorimetrischen Messungen
Assess cell viability and proliferation with colorimetric readouts
Erfahren Sie, wie Absorptions-Mikroplatten-Reader kolorimetrische Messungen der Zellviabilität oder Zellproliferation ermöglichen.
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Application Note
HTRF-Zytokin-Assays zur Überlebensfähigkeit von Zellen normalisieren
Normalize HTRF cytokine assays to cell viability
Pro- und anti-inflammatorische Zytokine spielen eine zentrale Rolle in der Autoimmunität und in entzündlichen und infektiösen Erkrankungen. Auch sind sie wichtige Akteure in metabolischen Erkrankungen und der Onkologie, …
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Application Note
Zellen zählen, mit dem Durchlicht-Analyse-Modul in MetaXpress
Counting cells with the Transmitted Light Analysis Module in MetaXpress
Labelfreie zelluläre Assays werden für eine Vielzahl von biologischen Anwendungen zur Überwachung der Zellzahl, Proliferation, Gesundheit, Konfluenz und Zytotoxizität von Zellen benötigt. In dieser Application Note …
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Application Note
Die Gesundheit von Zellen mit Zellviabilitäts-Assays auf dem SpectraMax iD3 Reader bestimmen
Measuring cell health on the SpectraMax iD3 reader with cell viability assays
Die Bestimmung der Gesundheit von Zellen aus den verschiedenen Perspektiven der Signalwege der Überlebensfähigkeit und Apoptose können Einsichten in die Auswirkungen einer Vielfalt von experimentellen Behandlungen geben, darunter …
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Application Note
Arbeitsablauf zur Messung von IgG in der Zelllinien-Entwicklung optimieren
Streamline the workflow for measuring IgG in cell line development
Der Prozess der Zelllinien-Entwicklung zur Herstellung von Antikörper-basierten Therapeutika kann unter den Forschern sehr verschieden ablaufen. Das letztendliche Ziel ist es, einen Klon zu finden, der große …
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Application Note
DNA- und RNA-Absorptionsmessungen mit SpectraMax Mikroplatten-Readern
DNA and RNA absorbance measurements using SpectraMax Microplate Readers
Ultraviolett (UV)-Messungen wurden in Mikroplatten möglich, als Molecular Devices die ersten UV-kompatiblen Mikroplatten-Reader vorstellte. Seitdem sind Messungen von DNA, RNA und Protein auf Mikroplatten …
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Application Note
Zuverlässige Sicherstellung der Klonalität durch Verwendung von Calcein-AM mit minimalen Auswirkungen auf die Überlebensfähigkeit
Confident assurance of clonality using calcein AM with minimal effect on viability
Die Entwicklung von Zelllinien, die ein bestimmtes Protein von Interesse exprimieren, ist ein wesentlicher Schritt bei der Erzeugung biopharmazeutischer Moleküle, wie z. B. monoklonaler Antikörper. Um eine Zelllinie zu etablieren …
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Application Note
EarlyTox Lebend/Tot-Assay-Kit auf SpectraMax Fluoreszenz-Mikroplatten-Readern
EarlyTox Live/Dead Assay Kit on SpectraMax Fluorescence Microplate Readers
Zellviabilitäts-Assays werden oftmals zur Beurteilung der Auswirkungen einer Vielfalt von Behandlungen durchgeführt, darunter die von Wirkstoffkandidaten, Signalwegaktivatoren und Reportergenen. Eine der beliebtesten …
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Application Note
Quantifizierung von dsDNA-Proben mithilfe der SpectraMax Quant dsDNA Assay-Kits
Quantitation of dsDNA samples using the SpectraMax Quant dsDNA Assay Kits
Da verschiedene Arten von zu testenden Proben unterschiedliche Konzentrationen von DNA aufweisen können, ist die Auswahl eines geeigneten Fluoreszenzreagenz mit der benötigten Empfindlichkeit und geeignetem Nachweisbereich …
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Application Note
Erstellen von Konfluenz- und Wachstumskurven mit dem CloneSelect Imager
Confluence and growth curve generation on the CloneSelect Imager
Die Fähigkeit, die Zellproliferation zu überwachen, hat insbesondere mit der weitverbreiteten Anwendung von in-vitro-Zelllinien als Modellsysteme zunehmend an Bedeutung gewonnen. Proliferationsraten können genutzt werden, um …
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Application Note
Verbesserte Entwicklung virusspezifischer Hybridome mit den Verfahren von ClonePix und CloneSelect Imager
Enhanced development of virus-specific hybridomas using ClonePix and CloneSelect Imager Technologies
Das ClonePix System wurde zum Hoch-Durchsatz-Screening Hunderter Subklon-Kolonien aus parentalem Hybridom-Material (ursprünglich war die Ausbeute aus der Parentalzelllinien weniger als 1 mg/ …
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Application Note
Optimierung der GFP-Transfektion mit der SpectraMax i3 Multi-Mode Detektionsplattform
Optimizing GFP transfection with the SpectraMax i3 Multi-Mode Detection Platform
Die Expression von Fluoreszenzproteinen, zum Beispiel Green Fluorescent Protein (GFP), wird oftmals zum Auslesen von Reportergen-Assays angewendet. In einem typischen Reporter-Assay wird die regulatorische Sequenz …
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Application Note
Unmittelbare Proteinquantifizierung mit der SpectraDrop Mikrovolumen-Mikroplatte
Direct protein quantitation using the SpectraDrop Micro-Volume Microplate
Die Quantifizierung von Proteinen mittels UV-Absorption ist eine schnelle, zerstörungsfreie Methode, die auf der Absorption von Wellenlängen des Lichts im nahen UV-Bereich durch Tryptophan- und Tyrosinreste beruht, …
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Application Note
Lumineszenz-Zellüberlebensfähigkeits- und -Zytotoxizitäts-Assays auf dem SpectraMax i3x Multi-Mode Mikroplatten-Reader
Luminescent cell viability and cytotoxicity assays on the SpectraMax i3x Multi-Mode Microplate Reader
Der CellTiter-Glo Assay von Promega verwendet das Enzym Luciferase, das ATP benötigt, um Licht zu erzeugen. Das Lumineszenzsignal, das im Assay erzeugt wird, hängt von der Menge an ATP in der …
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Application Note
Visualisieren Sie subzelluläre Vesikel zur Quantifizierung der Autophagie in neuronalen Zellen
Visualize subcellular vesicles to quantitate autophagy in neuronal cells
Autophagie ist ein intrazellulärer Prozess, der Proteine freisetzt oder degradiert sowie Organellen, die als geschädigt eingestuft oder von der Zelle nicht mehr länger gebraucht werden, …
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Application Note
Steigern Sie die Empfindlichkeit von Assays ohne Wäsche mit konfokalem Imaging
Increase sensitivity in no-wash assays using confocal imaging
Das Screening von Hybridom-Überständen auf Antikörper, die gegen Oberflächenantigene gerichtet sind, ist ein wichtiger Schritt beim Auffinden und Entwickeln von Antikörpern für Impfstoffe oder zur therapeutischen Anwendung …
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Application Note
Nachweis und Quantifizierung von Proteinen mit dem ScanLater Western Blot-Detektionssystem
Detection and quantitation of protein with ScanLater Western Blot Detection System
Die Detektion von Proteinen ist heute für die pharmazeutische und klinische Forschung äußerst wichtig, und Western Blots gehören mit zu den üblichsten Methoden, die für diesen Zweck angewendet werden. Verschiedene Techniken werden angewendet, um …
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Application Note
Messung der Luciferase-Expression mit dem SpectraMax Glo Steady-Luc Reporter Assay-Kit
Measuring luciferase expression using the SpectraMax Glo Steady-Luc Reporter Assay Kit
Der Einsatz von Genreportern wie Luciferasen erlaubt eine hochempfindliche und zerstörungsfreie Überwachung der Genexpression. Die Glühwürmchen-Luciferase, ein 61 kD großes monomeres Protein, ist für Forscher besonders …
Videos und Webinare
Arbeitsablauf für Hybridome