Lebendzellen-Imaging
Entwickeln Sie Assays, die die in-vivo-Natur von Zellen am besten nachahmen
Was ist Lebendzellen-Imaging?
Vorteile der Lebendzellforschung
Das Lebendzellen-Imaging stellt ein grundlegendes Forschungswerkzeug in Biologielaboren und vielen verschiedenen Industrien dar. Und es hat zur Entdeckung von Wirkstoff-Targets und Wirkstoffkandidaten sowie den molekularen Mechanismen, die an Krankheiten beteiligt sind, beigetragen. Für diese Forscher ist die Fähigkeit, Assays zu entwickeln, die die In-vivo-Natur von Zellen am besten nachahmen, entscheidend. Die Vorteile des Lebendzellen-Imaging umfassen:
- Lebende Zellen über die Zeit zu beobachten liefert mehr als nur eine Momentaufnahme dessen, was in den Zellen passiert. Es ermöglicht die Visualisierung vorübergehender Ereignisse, die bei einem Endpunkt-Assay möglicherweise übersehen worden wären und lässt optimale Zeitpunkte für Endpunkt-Assays erkennen.
- Eine strenge Regulation der Umgebungsbedingungen stellt sicher, dass die zellulären Strukturen und Prozesse unter dem für sie nativen physiologischen Zustand untersucht werden.
- Lebende Zellen in ihrem natürlichen Zustand abzubilden minimiert Artefakte, die bei anderen Imaging-Techniken auftreten können, wie z. B. bei der Fixierung und der Immunfärbung von Zellen.
- Die Lokalisierung und der Transport von zellulären Biomolekülen kann gleichzeitig zusammen mit dem Verlauf verschiedener Signalwege in Echtzeit erforscht werden.
- Die laterale, axiale und temporale Aufnahme von Bildern ermöglicht das Erzeugen von 4D-Abbildungen und -Daten.
- Das Lebendzellen-Imaging molekularer Dynamiken erzeugt qualitative und quantitative Daten, die durch andere biochemische Methoden nicht erzeugt werden können.
Arbeitsablauf zelluläres Imaging und Analyse
Die Protokolle zur Kultivierung, das Ausplattieren und die Pflege von lebenden Zellen unterscheiden sich zwischen unterschiedlichen Zellmodellen. Die unten aufgeführten Schritte stellen jedoch einen allgemein gültigen Arbeitsablauf für Lebendzell-Assays dar.
https://main--moleculardevices--hlxsites.hlx.page/applications/cell-imaging
- Plattieren Sie die Zellen in Laborgefäßen Ihrer Wahl aus (Kammerobjektträger, Schalen, Mikroplatten).
- Behandeln Sie die Zellen – Führen Sie eine Behandlung der Zellen mit den gewünschten Verbindungen, RNAi, etc. durch, falls dies Teil des Arbeitsablaufs des Assays ist.
- Färben Sie auf Marker – Falls erforderlich, markieren Sie die Zellen mit den gewünschten Fluorophoren (fluoreszente Farbstoffe, fluoreszierendes Protein – Peptidfusionen, etc.).
- Umgebungskontrollen – Falls die Aufnahmen über einen langen Zeitraum hinweg erfolgen oder falls der Assay ein Zeitraffer-Experiment mit Lebendzellen ist (kontinuierlich oder diskontinuierlich), ermöglichen Sie eine vollständige Umgebungskontrolle, einschließlich Gas, Temperatur und Feuchtigkeit.
- Aufnahme der Zellen – Stellen Sie die Platte in ein automatisiertes Imaging-System und starten Sie die Aufnahme ihrer Lebendzell-Bilder.
- Analysieren Sie die Zellbilder – Verwenden Sie eine Software für zelluläre Bildanalyse, um eine quantitative Analyse der Bilder lebender Zellen durchzuführen.
Lebendzellen-Imaging-System
Hochentwickelte Systeme für das Lebendzell-Imaging bieten die Möglichkeit, die Umgebungsbedingungen zu kontrollieren, um die Gesundheit und Überlebensfähigkeit von Zellen aufrechtzuerhalten, während molekulare und zelluläre Dynamiken auf der Ebene einer einzelnen Zelle bis hin zur Ebene ganzer Organismen überwacht werden. Angefangen bei der Untersuchung schneller kinetischer Ereignisse bis hin zur Durchführung von Zeitraffer-Assays bietet das automatisierte Lebendzellen-Imaging eine direkte Überwachung dynamischer biologischer Prozesse und ermöglicht das Erzeugen einer Vielzahl zellulärer Informationen.
- Die Fähigkeiten des labelfreien Hellfeld-Imaging bis hin zu denjenigen des Fluoreszenz-Imaging bieten die erforderliche Flexibilität für eine große Anzahl an Lebendzellen-Imaging-Anwendungen.
- Eine hohe Aufnahmegeschwindigkeit ermöglicht die Untersuchung schneller kinetischer Ereignisse, wie die Calcium-Oszillation in Kardiomyozyten.
- Die robusten Fokussierungsfähigkeiten automatisierter Lebendzellen-Imaging-Instrumente stellen die Einhaltung des optimalen Fokus über die gesamte Aufnahmedauer hinweg sicher. Dies ist zur Erzeugung präziser Lebendzellen-Imaging-Daten entscheidend.
Anwendungen und Assays
Die Fortschritte bei automatisierten Mikroskopen mit integrierten Kammern zur Umgebungskontrolle sowie in der Technologie fluoreszierender Proteine und synthetischer Fluorophore haben die Fähigkeiten von Forschern, die biologische Prozesse in lebenden Zellen untersuchen, ausgeweitet.
Unsere Systeme für High-Content-Imaging und -Analyse ermöglichen eine flexible Skalierbarkeit, mit der Sie Ihr System im Gleichschritt mit Ihrer Forschung weiter ausbauen können. Sie verfügen über Optionen und Module, mit denen Ihr spezieller Forschungsbedarf adressiert werden kann, darunter Objektive, Filter, Imaging-Modi und Umgebungskontrolle. Hier stellen wir eine Zusammenstellung von Anwendungen und Assays zur Verfügung, die diese wichtigen Funktionen für Ihre Lebendzellen-Imaging-Forschung nutzen:
Neueste Ressourcen
Arbeitsablauf Lebendzellen-Imaging und Analyse
Der beschriebene Arbeitsablauf für das Lebendzellen-Imaging ist ein verallgemeinertes Beispiel für einen kontinuierlichen Langzeit-Zeitraffer-Assay. Dieser Arbeitsablauf untergliedert die Schritte von der Ausplattierung der Zellen bis hin zur Bildanalyse und beleuchtet die Materialien und Instrumente, die zur Durchführung eines Lebendzellen-Assays erforderlich sind – einschließlich eines automatisierten High-Content Imaging-Systems und einer Software für zelluläres Imaging und Analyse.