Zell-Imaging & Analyse
Erfassen und analysieren Sie quantitative Daten für zellbasierte Modellanwendungen
Zell-Imaging: Aufnahme und Analyse
Forschern stehen dabei mehrere Optionen für Zell-Imaging-Methoden zur Verfügung, angefangen bei der Phasenkontrast-Mikroskopie, die intakte Zellen abbildet, bis hin zum Fluoreszenz-Imaging, das einzelne Moleküle und Organellen darstellt. Eine zelluläre Analyse wird durchgeführt, um den aktuellen Zustand der Zellen zu messen und zu beurteilen, wie z. B. die Zellintegrität, Toxizität und Überlebensfähigkeit und verschiedene andere Forschungsanwendungen. Ein wesentlicher Teil der zellulären Analyse ist die Erfassung, Analyse und der Export von Daten in einem aussagekräftigen und nutzenbringenden Format.
Arbeitsablauf zelluläre Analyse
Protokolle für die Kultivierung, das Ausplattieren und die Pflege von Zellen unterscheiden sich zwischen den unterschiedlichen Zellmodellen. Die unten aufgeführten Schritte stellen jedoch einen allgemein gültigen Arbeitsablauf für zellbasierte Imaging-Assays dar, von der vorgeschalteten Medienvorbereitung bis hin zur nachgeschalteten experimentellen Analyse mithilfe eines High-Content-Imaging-Systems und einer Software für zelluläre Analysen.
- Plattieren Sie die Zellen in Laborgefäßen Ihrer Wahl aus (Kammerobjektträger, Schalen, Mikroplatten).
- Behandeln Sie die Zellen – Führen Sie eine Behandlung der Zellen mit den gewünschten Verbindungen durch, falls dies Teil des Assay-Arbeitsablaufs ist.
- Färben Sie auf Marker – Falls erforderlich, markieren Sie die Zellen mit den gewünschten Fluorophoren (fluoreszente Farbstoffe, fluoreszierendes Protein – Peptidfusionen, etc.).
- Aufnahme der Zellen – Stellen Sie die Platte in das Imaging-System und starten Sie die Aufnahme Ihrer Lebendzellen-Bilder.
- Analysieren Sie die Zellbilder – Verwenden Sie eine Software für zelluläre Bildanalyse, um eine quantitative Analyse der Bilder lebender Zellen durchzuführen.
Beschleunigen Sie Ihr Screening mit automatisiertem und High-Content-Imaging
Dieses Technik-Webinar befasst sich mit High-Content-Screening-Anwendungen wie denjenigen, die in der Virusforschung, in Neuritenauswuchsstudien und für Organoidmodelle Anwendung finden. Die bereitgestellten Informationen sind für die Forscher von Bedeutung, die derzeit mit zellbasierten Assays arbeiten und Lebendzell-Imaging durchführen, und für diejenigen, die planen, ihre derzeitigen Imaging-Arbeitsabläufe zu automatisieren und/oder zu erweitern.
Arten zellulärer Imaging-Methoden
Unsere Lösungen für zelluläres Imaging können die Aufnahme- und Analysefunktionen bereitstellen, die dem Bedarf eines Forschungs- oder Screening-Labors entsprechen – egal ob ein High-Content- und High-Throughput-System oder ein einfach bedienbares System benötigt wird. Hier haben wir mehrere Methoden des zellulären Imaging kurz beschrieben:
- Die Phasenkontrast-Mikroskopie stellt intakte Zellen dar
- Das Fluoreszenz-Imaging kann einzelne Moleküle und Organellen darstellen
- Die Hellfeld-Mikroskopie ist zur schnellen Visualisierung ganzer Zellen anwendbar
- Die konfokale Mikroskopie wird für hochqualitative Abbildungen und 3D-Rekonstruktionen von Zellen bevorzugt
- Das 4D-Lebendzell-Imaging kombiniert die konfokale mit der Zeitraffer-Mikroskopie
- Die automatisierte Mikroskopie wendet Software- und Hardwarefunktionen an, die in jedem Sichtfeld eine robuste Fokussierung sicherstellen und die durch Kombination mit einer hochentwickelten Bildanalyse-Software reproduzierbare und subjektive quantitative Daten erzeugt
Gebräuchliche zellbasierte Assays und Anwendungen
Hier haben wir einige ausgewählte Themen zu zellbasierten Assays zusammengestellt, angefangen bei 3D-Zellkulturen bis hin zur Stammzellforschung, sowie Anwendungen für Kardiomyozyten und das Toxizitätsscreening
Neueste Ressourcen
Arbeitsablauf Zell-Imaging und -Analyse
Arbeitsablauf Zell-Imaging und -Analyse
ZELLEN AUSPLATTIEREN
Plattieren Sie die adhärenten oder suspendierten Zellen in dem Laborgefäß der Wahl aus, einschließlich Kulturschalen, Kammerobjektträger und Mikroplatten. Inkubieren Sie die Zellen unter den normalen Kulturbedingungen (z. B. 37°C, 5% CO2). Die plattierten Zellen über Nacht zu inkubieren wird ausreichend Zeit für das Anheften und das Wachstum der Zellen gewähren.
96- oder 384-Well-Platten
Die meisten Zellkulturen werden für das High-Content-, High-Throughput-Screening in 96- oder 384-Well-Mikroplatten kultiviert.
BEHANDLUNG MIT VERBINDUNGEN
Falls es für das Protokoll erforderlich ist, behandeln Sie die Zellen mit den Verbindungen von Interesse.
Die Verbindungen können für Minuten oder bis zu einigen Tagen zu den Zellen hinzugegeben werden, je nach dem Wirkmechanismus der untersuchten Verbindung und der untersuchten biologischen Antwort. Apoptose- oder Rezeptorinternalisierungs-Assays erfordern beispielsweise generell kürzere Inkubationszeiten, während multiparametrische Zytotoxizitäts-Assays längere Zeiten erfordern. Längere Behandlungen mit Verbindungen erfordern möglicherweise den Austausch der Verbindungen während der Inkubationszeit.
AUF MARKER FÄRBEN
Lebendzellen können mit einer Vielzahl verschiedener Fluorophore gefärbt oder mit Konstrukten transfiziert / transduziert werden, die ein fluoreszierendes Protein – Peptidfusionen beinhalten. Bei der Färbung sollten die Anweisungen des Herstellers befolgt werden. Eine Färbung ist nicht für alle Lebendzellen-Anwendungen notwendig. Ein labelfreies Imaging mit entsprechender Analyse ermöglicht die Nachverfolgung und die Überwachung von Zellen ausschließlich im Hellfeld.
Assay-Kits
Benutzerfreundliche, robuste Assay-Kits für die Life Science-Forschung, Wirkstoffforschung und Wirkstoffentwicklung, und für Bioassays. Unsere Assay-Kits sind für die Verwendung mit unseren Instrumenten optimiert. Screenen Sie mehr Verbindungen zu früheren Zeitpunkten in der Wirkstoffentwicklung und ermöglichen Sie für Testverbindungen die Beschreibung eines vollständigen Konzentrations-Antwort-Profils der Testverbindungen.
Portfolio ImageXpress High-Content-Imaging
Unsere Systeme für High-Content-Imaging und -Analyse bieten eine flexible Skalierbarkeit, mit der Sie Ihr System im Gleichschritt mit Ihrer Forschung weiter ausbauen können. Sie verfügen über Optionen und Module, mit denen Ihre spezielle Forschung adressiert werden kann, darunter Objektive, Filter, Imaging-Modi und Umgebungsbedingungen.
AUFNAHME VON LEBENDZELLEN-BILDERN
Konfigurieren Sie für kontinuierliche Zeitrafferaufnahmen die Gesamtlänge der Zeitserie und die Aufnahmeintervalle, z. B. eine Aufnahme pro Stunde für 24 Stunden.
Diskontinuierliche Zeitrafferaufnahmen können durchgeführt werden, indem die Platte zu verschiedenen Zeitpunkten aus dem Inkubator genommen und wieder hineingestellt wird.
ZELLAUFNAHMEN ANALYSIEREN
Analysieren Sie die Aufnahmen mit einer Imaging-Software für zelluläre Analysen, um für die erforschten biologischen Reaktionen multiparametrische Ergebnisse zu erzeugen. Aus Zeitraffer-Aufnahmen können kinetische Daten erzeugt und überprüft werden.
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Datenerfassungs- und Datenanalyse-Software für zelluläres Imaging
Die MetaXpress® Software zur High-Content-Bilderfassung und -analyse ist eine umfassende Lösung zur High-Content-Analyse, die einen streng organisierten und integrierten Arbeitsablauf bietet. Das Portfolio von Anwendungsmodulen erfüllt eine große Bandbreite von Bedürfnissen, angefangen bei einer einfachen Handhabung bis hin zum individuellen Assaydesign. Diese Software umfasst leistungsstarke und elegante Werkzeuge für das 2D- und 3D-Imaging, wie z. B. die Zeitrafferanalyse. Mit Unterstützung durch unseren Aufnahmeerfassungs-Konfigurationsassistenten werden Sie Daten in wenigen Minuten generieren.