Lumineszenz

Wie funktioniert die Lumineszenzdetektion?

Im Gegensatz zur Fluoreszenz, bei der ein Molekül infolge der Anregung durch eine externe Lichtquelle Licht emittiert, wird Lumineszenz durch eine chemische oder biologische Reaktion erzeugt, zum Beispiel durch ein Enzym und sein Substrat. Das daraus entstehende Licht kann von einer Photomultiplier-Röhre (PMT, photomultiplier tube) detektiert werden. In dieser werden Photonen so zu Elektronen umgewandelt, dass der entstehende Strom proportional zur Menge an Licht ist. Die Messung des Signals wird in relativen Lichteinheiten (RLU, relative light units) ausgegeben.

Erfahren Sie mehr über unsere Lumineszenz-Reader  

Wie funktioniert ein Luminometer?

Wenn eine Lumineszenzreaktion in einer Mikroplatte angesetzt wird, wird ein Luminometer (oder Lumineszenz-Mikroplatten-Reader) verwendet, um die Menge des produzierten Lichts zu messen. Die Mikroplatte wird in eine lichtdichte Messkammer eingesetzt und das Licht aus jeder Vertiefung wird durch eine PMT detektiert. Lumineszenz-Messungsergebnisse werden in RLU ausgegeben.

In den meisten Lumineszenzanwendungen wird das Gesamtlicht, das von der Probe produziert wurde, gemessen – ohne die Isolation bestimmter Wellenlängen. Für andere Anwendungen wie BRET kann ein Lumineszenz-Platten-Reader jedoch auch mit Filtern oder Monochromatoren ausgestattet werden. Diese ermöglichen die Isolation bestimmter Wellenlängen, um Bindungen oder andere biomolekulare Ereignisse zu messen.

Erfahren Sie mehr über den SpectraMax L Microplate Reader  

NanoBRET / BRET

BRET (Biolumineszenz-Resonanzenergietransfer) ist eine Technik zur Messung von Protein-Protein oder Protein-Ligand-Interaktionen, die die Interaktion eines biolumineszenten Donors und eines Fluoreszenz-Akzeptors einschließen.

Die Detektion von NanoBRET-Signalen und die Analyse der daraus hervorgehenden Daten erfordert empfindliche Instrumente und eine fortschrittliche Software. Melden Sie sich hier an, um mehr zu erfahren:

• Messen Sie die p53-MDM2-Proteininteraktion mit der NanoBRET Technologie
• NanoBRET-Technologie auf dem SpectraMax i3x Multi-Mode Mikroplatten-Reader

Single- / Dual-Luciferase Reportergen-Assays

Reportergen-Assays sind wichtige Werkzeuge für die Untersuchung der Genexpression, die mit der Aktivierung zellulärer Signalwege im Zusammenhang steht. Zellen werden mit einem Plasmid transfiziert, das das Reportergen und eine zu untersuchende Sequenz trägt – üblicherweise ein Promotor oder ein anderes Transkriptions-Kontrollelement. Wenn der Promotor aktiviert wird, wird das Reportergen exprimiert und seine Menge kann bestimmt werden.

Erfahren Sie mehr über Dual-Luciferase-Reportergen-Assays:

• Überwachen Sie die Aktivierung von NF-κB mit sensitiven Dual-Reporter-Assays auf dem SpectraMax iD5 Microplate Reader*
• Erfassen Sie die Expression der Dual-Luciferase auf dem FlexStation 3 Mikroplatten-Reader
• Dual-Luciferase-Assays in 96- und 384-Well-Formaten auf dem SpectraMax L
• Messung der Luciferase-Expression mit dem SpectraMax Glo Steady-Luc Reporter Assay-Kit

Bahnbrechende Kundenerfolge

Die Universität Genf nutzt den SpectraMax® L Microplate Reader für Luciferase-basierte Assays

Um entscheidende Arbeiten an der Universität Genf zu unterstützen, nutzt die Gruppe von M. Yves Cambet eine Vielfalt an hochmodernen Mikroplatten-Readern, auch den SpectraMax L für Luciferase-basierte Assays.

Mehr erfahren  

Reaktive Sauerstoffspezies (ROS)

Reaktive Sauerstoffspezies (ROS, Reactive Oxygen Species) sind chemisch reaktive Moleküle, die Sauerstoff enthalten. In Eukaryoten werden diese Moleküle hauptsächlich während der aeroben Atmung gebildet und können Probleme wie DNA-Schäden und Lipidperoxidation verursachen, was letztendlich zu Zellschäden führt.  

Wir zeigen, wie die SpectraMax® Microplate Reader eingesetzt werden können, um ROS-Konzentrationen mit einem Lumineszenz-basierten Assay genauestens zu bestimmen.

• Messung reaktiver Sauerstoffspezies mit SpectraMax Microplate Readern

Zytotoxizitäts-Assay

Die Zytotoxizität wird oft als Antwort auf eine experimentelle Behandlung mit Wirkstoffen gemessen. Für die Identifizierung neuer therapeutischer Behandlungen oder das Verständnis zellulärer Signalwege, die sich auf die Gesundheit auswirken, ist es entscheidend, eine Methode zur Hand zu haben, mit der Zytotoxizität in behandelten Zellen einfach gemessen werden kann. Typische Indikatoren für Zytotoxizität umfassen den Gehalt an ATP in einer Zellpopulation und die Integrität zellulärer Membranen. Für beide Messungen steht eine Vielfalt von Mikroplatten-basierten Assays zur Verfügung.

Erfahren Sie mehr über Zytotoxizität in Zellen:

• Zytotoxizität in Zellen: Einfache Bestimmung per Lonza ViaLight Plus und ToxiLight BioAssays auf dem SpectraMax L Mikroplatten-Luminometer

ATP-basierte Zellviabilitäts-Assays

Lumineszente ATP-Assays für Zellviabilität und Zytotoxizität bieten eine sensitive und schnelle Vorgehensweise, um die Anzahl überlebensfähiger Zellen in Kultur zu bestimmen und die zytotoxischen Effekte einer experimentellen Behandlung zu quantifizieren. Durch die Nutzung eines SpectraMax® Microplate Reader können diese Assays in einem Hochdurchsatz-Format durchgeführt werden.

Entdecken Sie den CellTiter-Glo Luminescent Cell Viability Assay und mehr:

• Lumineszenz-Zellüberlebensfähigkeits- und -Zytotoxizitäts-Assays auf dem SpectraMax i3x Multi-Mode Microplate Reader
• Messen Sie die Überlebensfähigkeit von Krebszellen mit einem homogenen, stabilen Lumineszenz-Assay

Chemilumineszenter ELISA

Vaskuläre endotheliale Wachstumsfaktoren (VEGFs, vascular endothelial growth factors) sind eine Familie von sezernierten Polypeptiden, die mit der Entwicklung von Blutgefäßen in Säugetieren und mit Krankheitsprozessen, die mit einem abweichenden Wachstum von Blutgefäßen einhergehen, in Zusammenhang gebracht werden.

Erfahren Sie mehr über die chemilumineszente ELISA-Methode, die mit unserem Luminometer und unserer Datenerfassung- und Analysesoftware durchgeführt wird:

• Chemilumineszente VEGF ELISA mit dem SpectraMax L Mikroplatten-Luminometer

Mykoplasmaüberwachung

Mykoplasmen, die kleinsten und einfachsten Prokaryoten, sind häufig vorkommende Kontaminanten in Zellkulturen. Eine Kontamination mit Mykoplasmen zeigt sich in verminderten Proliferationsraten und Veränderungen in zellulären Antworten, darunter der Genexpression.

Erfahren Sie, wodurch der MycoAlert Assay und der MycoAlert PLUS Assay von Lonza eine schnelle und komfortable Vorgehensweise bietet, um mit einem Lumineszenz-Mikroplatten-Reader lebende Mykoplasmen in Zellkulturen nachzuweisen

• MycoAlert Mykoplasma-Detektions-Assays auf Mikroplatten-Readern von Molecular Devices