Zellsortierung mittels Imaging und Analyse zur Sicherstellung der Monoklonalität

Der CloneSelect™ Single-Cell Printer™ (SCP) nutzt Mikrofluidik-Technologie und Bildanalyse in Echtzeit, um einzelne Zellen zu sortieren und in Standard-Mikroplatten abzusetzen. Zur Einweg-Dispensierung wird eine innovative Kartusche verwendet, die der Technologie eines Tintenstrahldruckers ähnelt. Er kann eine 96-Well-Platte in 5 bis 10 Minuten drucken und funktioniert mit 384-Well-Platten. Fünf Abbildungen werden während der Verteilung der Zellen aufgenommen und bieten einen Nachweis für die Isolierung von Einzelzellen.

  • Effizient

    Sortieren Sie einzelne Zellen effizient

    Sortieren Sie einzelne Zellen mit höherer Effizienz (> 80 %) als limitierende Verdünnungsreihen und mit höherer Überlebensfähigkeit als bei der Sortierung mittels Durchflusszytometrie (durchschnittlich zwischen 50–90 %, abhängig vom Zustand der Zelle).

  • Abbildung

    Erfassen Sie Nachweise für die Zellisolierung

    Nehmen Sie während der Abgabe einer Zelle eine Sequenz von fünf Bildern auf, die als Bildnachweis für die Monoklonalität dienen. Eine weite Schärfentiefe und 10x Vergrößerung gewährleisten Bildschärfe 99 % der Zeit.

  • Auswählen

    Differenzieren Sie Einzelzellen ganz einfach

    Unterscheiden Sie schnell zwischen Einzelzellen, mehreren Zellen, keine Zellen und Zellbruchstücken durch hochauflösendes Imaging mit firmeneigenen Algorithmen. Einzelne Zellen werden ausplattiert, während unerwünschte Proben durch Absaugen entfernt werden.

CloneSelect Single-Cell Printer

Merkmale

  • Mikrofluidik-Technologie

    Ein mikrofluidischer Siliziumchip in der Kartusche erzeugt freifliegende, pikolitergroße Tröpfchen, in die Zellen eingeschlossen sind. Ausschließlich hochwertige Zellen werden in Platten ausgesät.

  • Bildbasierte Dokumentation

    Während der Verteilung von Einzelzellen werden fünf Bilder aufgenommen, die als Bildnachweis für die Monoklonalität dienen und für die Zulassungsunterlagen verwendet werden können.

  • Absetzen mehrerer Zellen pro Vertiefung

    Die Einstellungen der Software können so verändert werden, dass 1 bis 100 Zellen pro Vertiefung abgegeben werden.

  • Sterile Kartuschen

    Die Kartuschen sind einzeln in sterile Verpackungen eingeschweißt, um Kreuzkontamination zu vermeiden. Eine einzige Kartusche kann zum Drucken mehrerer Mikroplatten verwendet und wieder aufgefüllt werden.

  • Dispensierung einer großen Vielfalt von Zelltypen

    Ein großes Spektrum an Zelltypen, wie CHO, HEK293 und L929, kann dispensiert werden. Die Zellen können sich in einem Größenbereich von 5 bis 40 µm bewegen.

  • Kompaktes Design

    Der CloneSelect SCP Drucker hat eine kleine Stellfläche und passt ganz einfach auf Labortische, PCR-Arbeitsstationen sowie in das Innere von Standard-Sicherheitswerkbänken.

Anwendungen für den CloneSelect Single-Cell Printer

  • Entwicklung von Zelllinien für rekombinante Proteine

    Zelllinienentwicklung

    Die Entwicklung von Zelllinien ist ein wesentlicher Schritt im Prozess der Erzeugung biopharmazeutischer Moleküle wie z. B. monoklonaler Antikörper. Der Prozess beginnt meistens mit der Transfektion des Wirtszelltyps mit DNA, die das therapeutische Protein von Interesse kodiert. Eine zufällige oder gezielte Integration der Ziel-DNA in das Genom der Wirtszelle wird so ermöglicht. Tausende von Klonen werden überprüft, um dann die wenigen zu isolieren, die große Mengen produzieren – ein manueller und zeitaufwendiger Prozess.

    E-Book herunterladen 

  • Entwicklung von Zelllinien und Sicherstellung der Monoklonalität

    Sicherstellung der Monoklonalität

    Die Entwicklung von Zelllinien und die Sicherstellung der Monoklonalität sind entscheidende Schritte im Herstellungsprozess biopharmazeutischer Moleküle, wie z. B. monoklonaler Antikörper. Eine Zelllinie kann nach der Isolierung einer einzigen überlebensfähigen Zelle, die das Protein von Interesse robust exprimiert, etabliert werden. Ein entscheidender Meilenstein in diesem Prozess ist die Dokumentation des Nachweises der Klonalität. Die Dokumentation der Klonalität basiert üblicherweise auf Abbildungen, wobei eine Aufnahme einer einzelnen Zelle erstellt und in die Zulassungsunterlagen mit aufgenommen wird.

    Application Note lesen 

  • Einzelzellsortierung mit dem CloneSelect Single Cell Printer

    Einzelzellsortierung

    Die Entwicklung von Zelllinien erfordert das Auffinden von aus Einzelzellen hervorgegangenen Klonen, die hohe und gleichbleibende Mengen des therapeutischen Zielproteins herstellen. Der erste Schritt in diesem Prozess ist die Isolierung einzelner, überlebensfähiger Zellen. Die limitierende Verdünnungsreihe ist eine Technik, die sich auf statistische Wahrscheinlichkeit stützt, jedoch zeitraubend ist. Der CloneSelect Single-Cell Printer ermöglicht eine schonende Isolierung von Zellen auf eine Art und Weise, dass die Überlebensfähigkeit von Zellen maximiert wird, und dabei auch einen direkten Nachweis der Klonalität durch eine Serie von fünf Bildern, die während der Abgabe der Zellen aufgenommen werden, bietet.

Technische Daten und Optionen für den CloneSelect Single-Cell Printer

**Die Druckzeit kann je nach Zelldichte und den angewendeten Eingrenzungsparametern variieren. Die durchschnittliche Druckzeit für Beads bei einer Konzentration von 1 x 106 Beads/ml betrug 5–10 Minuten.

***Die Überlebensfähigkeit von Zellen kann je nach Zelltyp, Probenvorbereitung, Eingrenzungsparametern, Zellkulturmedien und anderen äußeren Faktoren variieren. Mit CHO, HEK, und anderen gebräuchlichen Zelllinien wurde eine typische Überlebensfähigkeit von 75 % beobachtet.

Ressourcen für den CloneSelect Single-Cell Printer

Videos und Demonstrationen

Wie der CloneSelect Single-Cell Printer funktioniert

CloneSelect Single-Cell Printer

Auf Mikrofluidik basierender Arbeitsablauf der Einzelzellisolierung zur Sicherstellung der Monoklonalität

Ein auf Mikrofluidik basierender Arbeitsablauf zur Einzelzellisolierung, der auf Effizient, Überlebensfähigkeit und Sicherstellung der Monoklonalität optimiert wurde

Zugehörige Produkte und Service für die CloneSelect Single-Cell Printer

Ausgewählte Anwendungen

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