Enzyme – IMAP-Assays

Die IMAP® Technologie bietet einen homogenen Assay, der sich für eine Vielzahl von Kinasen, Phosphatasen und Phosphodiesterasen ohne Beachtung der Substrat-Peptid-Sequenz eignet. Der Assay ist ein einfaches Mix-and-Read-Verfahren, das die genaue Bestimmung der Enzymaktivität ermöglicht.

IMAP bietet ein komplettes Assay-System für das Screening von Kinasen, Phosphatasen und Phosphodiesterasen
Da IMAP-Assays nicht auf Antikörpern basieren sondern generisch sind können sie für jede Kinase, Phosphatase oder Phosphodiesterase verwendet werden
Ein robustes Fluoreszenzsignal sorgt für zuverlässige Ergebnisse mit guten Z-Faktoren
IMAP-Assays sind homogen und lassen sich für größere Kosteneinsparungen miniaturisieren
IMAP-Assays sind sowohl für FP- als auch TR-FRET-Detektionsmodi verfügbar, je nach Screeninganforderungen der Anwender

Überblick über die Enzym – IMAP Assays

Basierend auf der spezifischen, hochaffinen Wechselwirkung mit dreiwertigen metallhaltigen Nanopartikeln (Perlen) ist IMAP eine generische, nicht-Antikörper-basierte Plattform zur Beurteilung der Kinase-, Phosphatase- und Phosphodiesterase-Aktivität Eine Enzymreaktion wird mit einem fluoreszent-markierten Substrat ausgelöst. Die Zugabe des IMAP-Bindungssystems stoppt die Enzymreaktion und initiiert die Bindung der Kügelchen an phosphorylierte Substrate. Die Bindung des Substrats an die Kügelchen, die mit der Enzymaktivität korreliert, kann entweder mit einer FP- oder mit einer TR-FRET-Auslesung erkannt werden.

Progressives IMAP-Bindungssystem

Das progressive IMAP-Bindungssystem erlaubt es Forschern, ihre FP- und TR-FRET-Assaybedingungen für jedes verwendete Substrat zu optimieren. Das System besteht aus dem progressiven Bindungspuffer A, dem progressiven Bindungspuffer B sowie dem progressiven Bindungsreagenz. Die beiden Puffer und das Reagenz können in verschiedenen Verhältnissen entsprechend der Säurehaltigkeit des ausgewählten Substrats, den gewünschten ATP-Konzentrationen und den Hintergrundparametern kombiniert werden.

IMAP-Substrate

Molecular Devices bietet eine große Bandbreite an validierten Substraten und Kalibratoren. Die Substrate können mit den Enzymen verwendet werden, für die sie ursprünglich validiert wurden, oder als potenzielle Substrate für andere Enzyme.
• Validierte IMAP-Substrate mit optimierten Bindungsbedingungen stellen die bestmögliche Leistung bei der Verwendung der IMAP-Plattform sicher
• Die Substrate gibt es in zwei Größen und können sowohl für IMAP FP als auch für IMAP TR-FRET verwendet werden
• Es wurden Dutzende verschiedene Substrate mit mehr als 100 Enzymen validiert. Viele Substrate sind entweder mit rot oder grün fluoreszenter Markierung verfügbar, was Multiplexing ermöglicht und eine mögliche Lösung von Problemen darstellt, die aufgrund der Autofluoreszenz von Verbindungen entstehen

IMAP Assay-Kits

Produktbezeichnung

Beschreibung

IMAP Bindungspuffer

IMAP Bindungsreagenz

TR-FRET
Tb-Spender

Markiertes Substrat

Demo-Kit

IMAP® Evaluations-Demo-Kit

Für Kinase-, Phosphatase- und Phosphodiesterase-Fluoreszenzpolarisations- oder TR-FRET-Assays. Besteht aus dem firmeneigenen IMAP-Bindungsreagenz und Bindungspuffern, markierten Kalibratoren/Substraten und TR-FRET Tb-Spendern, um eine Kalibrierungskurve für 800 Datenpunkte in einem Standard-384Well-Format durchzuführen.

Evaluations-Kits

IMAP® FP Evaluations-Kit

Für Kinase- und Phosphatase-Fluoreszenzpolarisations-Assays. Besteht aus einem firmeneigenen IMAP-Bindungsreagenz und Bindungspuffern, die ausreichen, um 800 Datenpunkte in einem Standard–384Well-Format zu erzeugen. Markierte Substrate sind separat zu erwerben.

k. A.

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IMAP® TR-FRET Evaluations-Kit

Für Kinase- und Phosphatase-TR-FRET-Assays. Besteht aus einem firmeneigenen IMAP-Bindungsreagenz und Bindungspuffern, TR-FRET Tb-Donor, die ausreichen, um 800 Datenpunkte in einem Standard–384Well-Format zu erzeugen. Markierte Substrate sind separat zu erwerben.

Separat bestellen

IMAP® PDE FP Evaluations-Kit

Für Phosphodiesterase (PDE) Fluoreszenzpolarisations-Assays. Besteht aus einem firmeneigenen IMAP-Bindungsreagenz und Bindungspuffern, markierten cAMP- und cGMP-Substraten, die ausreichen, um 800 Datenpunkte in einem Standard–384Well-Format zu erzeugen

k. A.

IMAP® PDE TR-FRET Evaluations-Kit

Für Phosphodiesterase (PDE) TR-FRET-Assays. Besteht aus einem firmeneigenen IMAP-Bindungsreagenz und Bindungspuffern, markierten cAMP- und cGMP-Substraten, TR-FRET Tb-Donor, die ausreichen, um 800 Datenpunkte in einem Standard–384Well-Format zu erzeugen

Screening-Express-Kits

IMAP® FP Screening-Express-Kit

Screening-Express-Kit für Fluoreszenzpolarisation mit progressivem Bindungssystem. Besteht aus einem firmeneigenen IMAP-Bindungsreagenz und Bindungspuffern, die ausreichen, um 8.000 Datenpunkte in einem Standard–384Well-Format zu erzeugen. Markierte Substrate sind separat zu erwerben.

k. A.

Separat bestellen

IMAP® TR-FRET Screening-Express-Kit

TR-FRET Screening Express-Kit mit progressivem Bindungssystem. Besteht aus einem firmeneigenen IMAP-Bindungsreagenz und Bindungspuffern, TR-FRET Tb-Donor, die ausreichen, um 8.000 Datenpunkte in einem Standard–384Well-Format zu erzeugen. Markierte Substrate sind separat zu erwerben.

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Daten aus IMAP-Assays

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Technologie der Enzym – IMAP Assays

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#R8166

For kinase, phosphatase and Phosphodiesterase fluorescent polarization or TR-FRET assays. Consists of proprietary IMAP Binding Reagent and Binding Buffers, labeld calibrators/substrates, TR-FRET Tb-donor to run a calibration curve for 800 data points in a standard 384 well format.

#R8155

For kinase and phosphatase fluorescent polarization assays. Consists of proprietary IMAP Binding Reagent and Binding Buffers, sufficient to generate 800 data points in a standard 384 well format. Labeled substrates are available to purchase separately .

#R8161

For kinase and phosphatase TR-FRET assays. Consists of proprietary IMAP Binding Reagent and Binding Buffers, TR-FRET Tb-donor, sufficient to generate 800 data points in a standard 384 well format. Labeled substrates are available to purchase separately .

#R8175

For Phosphodiesterase (PDE) fluorescent polarization assays. Consists of proprietary IMAP Binding Reagent and Binding Buffers, labeld cAMP and cGMP substrates, sufficient to generate 800 data points in a standard 384 well format

#R8176

For Phosphodiesterase (PDE) TR-FRET assays. Consists of proprietary IMAP Binding Reagent and Binding Buffers, labeld cAMP and cGMP substrates, TR-FRET Tb-donor, sufficient to generate 800 data points in a standard 384 well format

#R8127

Fluorescence Polarization Screening Express Kit with Progressive Binding System. Consists of proprietary IMAP Binding Reagent and Binding Buffers, sufficient to generate 8,000 data points in a standard 384 well format. Labeled substrates are available to purchase separately .

#R8160

TR-FRET Screening Express Kit with Progressive Binding System. Consists of proprietary IMAP Binding Reagent and Binding Buffers, TR-FRET Tb-donor, sufficient to generate 8,000 data points in a standard 384 well format. Labeled substrates are available to purchase separately .

#R7470

Tb-donor for IMAP TR-FRET assay, sufficient amount for screening and generate 8,000 data points in a standard 384 well format.

#R7471

Tb-donor for IMAP TR-FRET assay, sufficient amount for high throughput screening and generate 50,000 data points in a standard 384 well format.

#R7505

Fluorescence labeled cAMP substrate 20 nmoles for IMAP phosphodiesterase (PDE) assays, sufficient for 8,000 data points based on 100 nM in reaction. Replaced R7091

#R7506

Fluorescence labeled cAMP substrate 120 nmoles for IMAP phosphodiesterase (PDE) assays, sufficient for 50,000 data points based on 100 nM in reaction.

#R7507

Fluorescence labeled cGMP substrate 20 nmoles for IMAP phosphodiesterase (PDE) assays, sufficient for 8,000 data points based on 100 nM in reaction. Replaced R7090

#R7508

Fluorescence labeled cGMP substrate 120 nmoles for IMAP phosphodiesterase (PDE) assays, sufficient for 50,000 data points based on 100 nM in reaction.

#R7110

Fluorescence labeled peptide 5FAM-GRPRTSSFAEG-COOH, substrate for Akt1, Akt2, Akt3, MSK1, MSK2, SGK1, Plk3, sufficient for 8,000 data points based on 100 nM in reaction

#R7129

Fluorescence labeled peptide LVEPLTPSGEAPNQK-5FAM-COOH, substrate for JNK1, JNK2,JNK3, p38 (α,β,γ,δ isoforms), sufficient for 8,000 data points based on 100 nM in reaction

#R7157

Fluorescence labeled peptide 5FAM-KVEKIGEGTYGVV-NH2, substrate for Src, Fyn, Lck, Yes, Hck, Rse, sufficient for 8,000 data points based on 100 nM in reaction

#R7172

Fluorescence labeled peptide 5FAM-KVEKIGEGTYGVV-NH2, substrate for Src, Fyn, Lck, Yes, Hck, Rse, sufficient for 50,000 data points based on 100 nM in reaction

#R7184

Fluorescence labeled peptide 5FAM-AKRRRLSSLRA-COOH, substrate for ROCK-II,Rsk1,Rsk2,Rsk3,Tab1, sufficient for 8,000 data points based on 100 nM in reaction

#R7229

Fluorescence labeled peptide 5FAM-AKRRRLSSLRA-COOH, substrate for ROCK-II,Rsk1,Rsk2,Rsk3,Tab1, sufficient for 50,000 data points based on 100 nM in reaction

#R7250

Fluorescence labeled peptide 5FAM-GRTGRRNSI-NH2, substrate for Aurora A, PKA, PKG, sufficient for 8,000 data points based on 100 nM in reaction

#R7252

Fluorescence labeled peptide 5FAM-GGGPATPKKAKKL-COOH, substrate for CDK1/Cyclin B, CDK2/Cyclin A, CDK2/CyclinE, CDK3/CyclinE, CDK5/p25, CDK5/p35,CDK6/Cyclin D3, sufficient for 8,000 data points based on 100 nM in reaction

#R7254

Fluorescence labeled peptide 5FAM-GRHDSGLDSMK-NH2, substrate for IKKβ, IKKα, sufficient for 8,000 data points based on 100 nM in reaction

#R7255

Fluorescence labeled peptide 5FAM-GRTGRRNSI-NH2, substrate for Aurora A, PKA, PKG, sufficient for 50,000 data points based on 100 nM in reaction

#R7257

#R7292

Fluorescence labeled peptide IPTTPITTTYFFFK-5FAM-COOH, substrate for Erk1, Erk2, p38 (α,β,γ,δ isoforms), sufficient for 8,000 data points based on 100 nM in reaction

#R7307

Fluorescence labeled peptide LVEPLTPSGEAPNQK-5TAMRA-NH2, substrate for JNK1, JNK2, JNK3, p38 (α,β,γ,δ isoforms), sufficient for 8,000 data points based on 100 nM in reaction

#R7311

Fluorescence labeled peptide 5FAM-HAAIGDDDDAYSITA-NH2, substrate for CK1, CK1δ, sufficient for 8,000 data points based on 100 nM in reaction

#R7312

Fluorescence labeled peptide 5FAM-HAAIGDDDDAYSITA-NH2, substrate for CK1, CK1δ, sufficient for 50,000 data points based on 100 nM in reaction

#R7313

Fluorescence labeled peptide 5TAMRA-GRTGRRNSI-COOH, substrate for PKA, PKG, sufficient for 8,000 data points based on 100 nM in reaction

#R7319

Fluorescence labeled phosphopeptide LVEPL-pT-PSGEAPNQ(K-5FAM)-COOH, substrate for assay calibration, sufficient for 8,000 data points based on 100 nM in reaction

#R7352

Fluorescence labeled peptide 5TAMRA-YSPTSPSYSPTSPSYSPTSPS-COOH, substrate for CDK7, sufficient for 8,000 data points based on 100 nM in reaction

#R7383

Fluorescence labeled peptide 5TAMRA-KKKSPGEYVNIEFG-NH2, substrate for Ros, Met, sufficient for 50,000 data points based on 100 nM in reaction

#R7434

Fluorescence labeled peptide 5FAM-IPTTPITTTYFFFK-NH2, substrate for Erk1, Erk2, p38 (α,β,γ,δ isoforms), sufficient for 8,000 data points based on 100 nM in reaction

#RP7005

Fluorescence labeled peptide 5FAM-LKKLRRRSDANF-NH2, substrate for CaMKI, sufficient for 8,000 data points based on 100 nM in reaction

#RP7030

Fluorescence labeled peptide 5FAM-RKRQGSVRRRVH-OH, substrate for PKC, sufficient for 8,000 data points based on 100 nM in reaction

#RP7032

Fluorescence labeled peptide 5FAM-RFARKGSLRQKNV-COOH, substrate for PKCζ, sufficient for 8,000 data points based on 100 nM in reaction

#RP7035

Fluorescence labeled peptide 5FAM-GRRESLTSFG-NH2, substrate for PKA, PKG, sufficient for 8,000 data points based on 100 nM in reaction

#RP7045

Fluorescence labeled peptide 5FAM-PLSRTLSVSSLPGL-NH2, substrate for c-TAK, sufficient for 8,000 data points based on 100 nM in reaction

#RP7046

Fluorescence labeled peptide 5FAM-GEILSRRPSYRK-NH2, substrate for MSK1, sufficient for 8,000 data points based on 100 nM in reaction

#RP7116

Fluorescence labeled peptide 5FAM-YSPTSPSYSPTSPSYSPTSPS-OH, substrate for TKL, STE, CK1, CMGC, sufficient for 8,000 data points based on 100 nM in reaction

#RP7119

Fluorescence labeled peptide 5FAM-EPPQSQEAFADLWK-NH2, substrate for TKL, STE, CK1, CMGC, sufficient for 8,000 data points based on 100 nM in reaction

#RP7120

Fluorescence labeled peptide 5FAM-RRRFRPASPLRGPPK-OH, substrate for Dyrk1A, TKL, STE, CK1, CMGC, sufficient for 8,000 data points based on 100 nM in reaction

#RP7123

Fluorescence labeled peptide 5FAM-ATGPLSPGPFGRR-OH, substrate for Erk2, TKL, STE, CK1, CMGC, sufficient for 8,000 data points based on 100 nM in reaction

#RP7131

Fluorescence labeled peptide 5FAM-FLTEYVATRWYRAPEIMLN-NH2, substrate for MAPK, TKL, STE, CK1, CMGC, sufficient for 8,000 data points based on 100 nM in reaction

#RP7140

Fluorescence labeled peptide 5FAM-GTFRSSIRRLSTRRR-OH, substrate for Nek2, IRAK4, sufficient for 8,000 data points based on 100 nM in reaction

#RP7153

Fluorescence labeled peptide 5FAM-GRSRSRSRSR-OH, substrate for SPRK1, IRAK4, sufficient for 8,000 data points based on 100 nM in reaction

#RP7548

Fluorescence labeled peptide 5FAM-ERMRPRKRQGSVRRRV-NH2, substrate for PKCγ, Pim1, sufficient for 50,000 data points based on 100 nM in reaction

#RP7609

Fluorescence labeled peptide 5FAM-KKRKSSLRRWSPLTPRQMSFDC-NH2, substrate for PKA, PKC, CAMK, MAPK, TKL, STE, CK1, CMGC, sufficient for 50,000 data points based on 100 nM in reaction

#RP7616

Fluorescence labeled peptide 5FAM-YSPTSPSYSPTSPSYSPTSPS-OH, substrate for TKL, STE, CK1, CMGC, sufficient for 50,000 data points based on 100 nM in reaction

#RP7640

Fluorescence labeled peptide 5FAM-GTFRSSIRRLSTRRR-OH, substrate for Nek2, IRAK4, sufficient for 50,000 data points based on 100 nM in reaction

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