Proteinnachweis basierend auf Europium-markierten Proteinen

Western Blot-Proteindetektion und -quantifizierung auf Grundlage von mit Europium markierten Proteinen mit einem Plattenreader

Hier berichten wir von einem neuartigen System für die Western Blot-Analyse, das in einen SpectraMax® Multimodus-Mikroplatten-Reader integriert wurde. Die Membranen werden mit Europium-markierten sekundären Antikörpern oder Streptavidin inkubiert, die das zu untersuchende Protein markieren. Europium (Eu) hat eine lange Fluoreszenzlebensdauer im Bereich von 1 ms, und der Nachweis erfolgt mithilfe des Nachweismodus für zeitaufgelöste Fluoreszenz (time resolved fluorescence, TRF). Dieser verringert den durch Autofluoreszenz oder andere Emissionen mit kurzer Lebensdauer verursachten Hintergrund signifikant.