Komplettfilter

Das Zielgen (Gen von Interesse) wird in einen Vektor mit den gewünschten Eigenschaften ligiert, wodurch ein rekombinantes Plasmid entsteht. Dies kann durch verschiedene Techniken erfolgen, einschließlich Gibson-Komplettfilter oder Golden Gate-Komplettfilter.

01

Transformieren

Die Ligationsprodukte werden in kompetente Bakterienzellen eingebracht, was die mikrobielle Aufnahme des konstruierten Plasmids und die Produktion vielfacher Plasmidkopien ermöglicht.

02

Kolonie-Plattierung und Screening

Die mikrobiellen Zellen werden auf festen Agarplatten verteilt, wo sie zu Einzelkolonien heranwachsen. Danach werden diese gescreent, um diejenigen für das Picken zu identifizieren, die die gewünschten Eigenschaften aufweisen.

03

QPix Picker für mikrobielle Kolonien

Kolonie-Picken

Sobald die gewünschten Kolonien identifiziert sind, können sie von den festen Agarplatten abgenommen und in Flüssigmedien übertragen werden, worin sie über Nacht inkubiert werden und wachsen

04

Inkubation über Nacht

Die Wachstumsplatten mit den flüssigen Medien werden versiegelt und in einen Schüttelinkubator transferiert, damit sich die Mikroben teilen und weitere Kopien des rekombinanten Plasmids produzieren können.

05

„Mini Prep“

Die Mikroben werden lysiert, um die rekombinanten Plasmide zu extrahieren. Plasmide werden dann mithilfe von Säulen- oder Bead-Methoden aufgereinigt, um hochreine DNA zu erhalten

06

Mit einem Spezialisten reden

Heute über
die Automatisierung Ihres
Plasmid-Workflows