Funktionsweise des Assay-Kits

Reportergen-Assays sind ein wichtiges Werkzeug zur Nachverfolgung zellulärer Ereignisse in Verbindung mit der Genexpression, Genregulation und Signaltransduktion. Glühwürmchen-Luciferase, einer der gängigsten Reporter, erzeugt Licht, indem sie eine Biolumineszenzreaktion katalysiert, bei der D-Luciferin im Beisein von Sauerstoff und ATP oxidiert wird. Die Renilla-Luciferase katalysiert die Coelenterazin-Oxidation zur Erzeugung von Licht. Aufgrund unterschiedlicher Substratanforderungen ist es möglich, die Aktivität beider Luciferasen in einer einzigen Probe durch sequenzielle Zugabe der Substrate zu messen. Es ergibt sich ein bequemer Assay mit zwei Anzeigen, die aufeinander normalisiert werden können und umfassendere Informationen über einen zellulären Signalweg oder ein zelluläres Ereignis liefern.